СТЕПЕНЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СУБСТРАТОВ РАЦИОНОВ И ЭНЕРГЕТИЧЕСКИЙ ОБМЕН У МОЛОДНЯКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ РАЗНОЙ РАСПАДАЕМОСТИ ПРОТЕИНА КОРМА
В.В. МИХАЙЛОВ, В.И. АГАФОНОВ,
М.В. СОРОКИН, А.М. КОРОВЯЦКИЙ
На бычках черно-пестрой породы в период интенсивного доращивания и откорма изучали влияние разной степени распадаемости протеина рационов на биоэнергетический статус, интенсивность роста и использование субстратов кормов в энергетическом обмене. Оценивали эффективность использования обменной энергии на прирост живой массы животных.
Определение степени использования субстратов рационов позволяет оценивать биоэнергетические процессы, регулирующие интенсивность и направленность метаболических потоков, за счет которых происходит трансформация питательных веществ корма в компоненты мяса. Для регулирования тканевого обмена, процессов обеспечения субстратами физиологических функций животных и биосинтеза компонентов прироста живой массы необходима информация об оптимальных источниках энергии и участии в обмене веществ метаболитов, не использованных в энергетическом обмене. В частности, вопросы регулирования аминокислотами тканевого энергетического обмена в последние годы являются актуальными и имеют важное значение для оценки механизмов, регулирующих процессы формирования мясной продуктивности бычков (1-3).
В связи с этим в задачу нашей работы входила оценка биоэнергетического статуса, эффективности использования обменной энергии и интенсивности роста у бычков в период интенсивного доращивания и откорма при разном содержании незаменимых аминокислот в рационах с разной распадаемостью протеина в рубце.
Методика. Объектом исследования служили бычки черно-пестрой породы (n = 10) 8-15-месячного возраста, содержащиеся в виварии на привязи. Животные получали корм 3 раза в сутки, индивидуально по детализированным нормам, разработанным для интенсивных технологий выращивания и откорма молодняка крупного рогатого скота (4). В период эксперимента ежесуточно учитывали потребление корма; интенсивность роста животных оценивали по результатам взвешивания до утреннего кормления в течение 2 сут подряд, а затем рассчитывали средний показатель. После предварительного периода, продолжавшегося 3 мес, по принципу парных аналогов, с учетом живой массы и интенсивности роста, бычки были распределены на две группы по 5 гол. в каждой: I и II -- соответственно контроль и опыт. протеин рацион корм субстрат
Разную обеспеченность аминокислотами создавали за счет применения разных по составу комбикормов. Животные I группы (контроль) получали типовой комбикорм на ячменной основе с подсолнечниковым шротом в качестве источника протеина с высокой распадаемостью в рубце. У бычков II группы (опыт) из состава комбикорма исключали подсолнечниковый шрот, но вводили кукурузный глютен и соевый шрот как источники протеина с низкой распадаемостью и с целью балансировки содержания некоторых незаменимых аминокислот (лизин, метионин), пивную дробину, диаммонийфосфат, серу и органические кислоты (яблочная, лимонная и фумаровая) для поддержания микробиологических процессов в рубце на высоком уровне. В рационах животных обеих групп содержалось одинаковое количество как сырого протеина, так и обменной энергии. Распадаемость протеина корма животных I и II групп составляла соответственно 71 и 64 %. Содержание обменной энергии в корме 14-месячных животных составляло 1,12 МДж/кг живой массы (табл. 1).
Респирационный анализ проводили до начала и перед завершением эксперимента, а также во время балансовых опытов (в 14-месячном возрасте), контрольный убой животных -- по окончании эксперимента. Калориметрический анализ образцов мышц животных проводили в 15-месячном возрасте (после убоя) в адиабатическом калориметре ВА-8М посредством выравнивания температуры в цилиндре последнего и окружающей среды в период сжигания проб.
В 14-месячном возрасте отбирали пробы крови из яремной вены через 3 ч после кормления. В цельной крови определяли концентрацию метаболитов -- АТФ, лактата и пирувата, а в сыворотке крови -- активность следующих ферментов: фруктозобифоcфатальдолазы (КФ 4.1.2.13), лактатдегидрогеназы (КФ 1.1.1.27), глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (КФ 1.1.1.49) и креатинкиназы (КФ 2.7.3.2). При этом использовали биохимические наборы, выпускаемые фирмами «Roche diagnostics GmbH» (Германия) и «Sigma diagnostics» (США). Кроме того, в пробах цельной крови бычков определяли концентрацию глюкозы глюкозооксидазным методом (5). Для математической обработки полученных данных применяли стандартные методы (6).
1. Состав и питательная ценность рационов бычков черно-пестрой породы
|
Ингредиент корма, субстрат |
I группа |
II группа |
|
|
С о с т а в р а ц и о н а |
|||
|
Сено злаково-бобовое, кг |
2,1 |
2,1 |
|
|
Силос злаково-бобовый, кг |
10,9 |
11,2 |
|
|
Комбикорм, кг |
4,2 |
4,2 |
|
|
Обменная энергия, МДж |
67,4 |
67,0 |
|
|
Сухое вещество, кг |
8,4 |
8,5 |
|
|
Сырой протеин, г |
1201 |
1234 |
|
|
Распадаемый протеин, г |
853 |
790 |
|
|
Нераспадаемый протеин, г |
348 |
444 |
|
|
Распадаемость протеина, % |
71 |
64 |
|
|
Сырая клетчатка, г |
1900 |
2048 |
|
|
Лигнин, г |
523 |
499 |
|
|
Гемицеллюлоза, г |
1623 |
1620 |
|
|
Целлюлоза, г |
1563 |
1594 |
|
|
Крахмал, г |
1510 |
1540 |
|
|
Сахар, г |
330 |
320 |
|
|
Сырой жир, г |
465 |
467 |
|
|
С о д е р ж а н и е с у б с т р а т о в в ж е л у д о ч н о - к и ш е ч н о м т р а к т е |
|||
|
Ацетат, г |
1832 |
1734 |
|
|
Пропионат, г |
788 |
833 |
|
|
Бутират, г |
447 |
437 |
|
|
Сумма аминокислот, г |
710 |
743 |
|
|
Сумма высших жирных кислот, г |
368 |
365 |
|
|
Глюкоза, молочная кислота, г |
109 |
118 |
|
|
П р и м е ч а н и е. Описание групп см. в разделе «Методика». |
Результаты. Использование в рационе бычков II группы протеина с заранее рассчитанной распадаемостью за счет включения доступных для микроорганизмов синтетических азотистых веществ и труднодеградируемого в рубце протеина (глютен и соевый шрот) способствовало регулированию процессов рубцового и кишечного пищеварения с последующим повышением эффективности биоконверсии питательных веществ корма в компоненты прироста живой массы. В преджелудках бычков II группы образовывалось больше пропионата, в тонком кишечнике -- аминокислот по сравнению с контролем (см. табл. 1).
Обеспеченность метаболизма аминокислотами за счет использования кормов, содержащих труднодеградируемый в рубце протеин и синтетические азотистые вещества (соответственно изопротеиновые и изокалорийные рационы), в период интенсивного доращивания и откорма позволило на 7,7 % увеличить среднесуточный прирост живой массы животных -- 122459 и 131856 г соответственно в I и II группах. В целом за 120 сут опыта прирост живой массы у бычков I и II групп составлял соответственно 147,07,0 и 158,06,7 кг (выше на 7,5 %). При этом у животных II группы за весь период эксперимента повышалась не только интенсивность роста, но и снижалось потребление корма и питательных веществ по сравнению с таковыми I группы: комбикорма, сухого вещества, сырого протеина и обменной энергии -- соответственно на 2,06; 4,18; 4,00 и 0,98 %. Следовательно, у животных в опыте затраты сухого вещества, сырого протеина и обменной энергии на единицу получаемой продукции были меньше соответственно на 4,1; 7,7 и 4,2 %.
По данным балансового опыта, при одинаковом потреблении валовой энергии и близких по величине потерях энергии с калом и мочой у бычков в опыте потери энергии с теплопродукцией были выше, чем в контроле (табл. 2). Затраты обменной энергии на поддержание интенсивности роста составляли 0,45 МДж/кг ЖМ0,75, а интенсивность прироста живой массы у бычков I и II групп -- соответственно 45,67 и 51,54 %.
2. Оценка баланса энергии и использования субстратов в энергетическом обмене 14-месячных бычков черно-пестрой породы в зависимости от состава и питательной ценности рациона
|
Показатель |
I группа |
II группа |
|
|
С о д е р ж а н и е (з а т р а т ы) о б м е н н о й э н е р г и и, МДж/сут |
|||
|
Валовая энергия корма |
139,43,6 |
139,51,9 |
|
|
Энергия кала |
52,51,0 |
53,23,8 |
|
|
Энергия переваримых питательных веществ |
86,93,7 |
86,43,0 |
|
|
Потери энергии с метаном и теплотой ферментации |
15,00,7 |
14,50,5 |
|
|
Энергия мочи |
4,50,3 |
4,90,4 |
|
|
Обменная энергия |
67,43,2 |
67,02,8 |
|
|
Энергия прироста живой массы |
13,70,9 |
15,11,7 |
|
|
Теплопродукция |
53,72,5 |
51,92,0 |
|
|
Дыхательный коэффициент, СО2/О2 |
0,840 |
0,858 |
|
|
К о л и ч е с т в о с у б с т р а т о в, г |
|||
|
Аминокислоты и другие азотистые вещества |
400 |
390 |
|
|
Ацетат и глюкоза |
1447 |
1580 |
|
|
Высшие жирные кислоты, кетоновые тела |
653 |
560 |
|
|
П р и м е ч а н и е. То же, что в таблице 1. |
Следует отметить, что при практически одинаковом уровне энергетического и протеинового питания количество субстратов, образующихся из питательных веществ корма, было различным, что позволило более эффективно использовать их при биосинтезе компонентов мяса у откармливаемых животных (см. табл. 2).
Известно, что на включение одной аминокислоты в полипептидную цепь клетка затрачивает четыре макроэргические связи: две из молекулы АТФ для активации аминокислоты и две из молекулы ГТФ на связывание с другой аминокислотой на рибосоме за счет образования новой пептидной связи. Скорость обмена АТФ (генерация и использование) была выше у бычков II группы, что сопряжено с активностью креатинкиназы (табл. 3). Это объясняется каталитическими свойствами креатинкиназы, которая в мышцах животных выполняет функцию энергетического буфера
(7). В итоге более высокая энергетическая обеспеченность биосинтетических процессов в мышечной ткани у бычков II группы способствовала повышению эффективности синтеза белка на фоне высокой интенсивности креатинкиназы (8).
3. Концентрация метаболитов в крови и активность ферментов в сыворотке крови 14-месячных бычков черно-пестрой породы в зависимости от состава и питательной ценности рациона
|
Показатель |
I группа |
II группа |
|
|
К о н ц е н т р а ц и я м е т а б о л и т о в в ц е л ь н о й к р о в и, мг% |
|||
|
АТФ |
33,21,3*** |
21,81,5*** |
|
|
Глюкоза |
61,91,4 |
64,42,0 |
|
|
Пируват |
1,20,3 |
0,80,1 |
|
|
Лактат |
12,62,8 |
12,81,6 |
|
|
А к т и в н о с т ь ф е р м е н т о в в с ы в о р о т к е к р о в и, е.а/л |
|||
|
Фруктозобифосфатальдолаза |
5,90,4 |
6,71,0 |
|
|
Лактатдегидрогеназа |
2752,0245,3 |
2920,0229,9 |
|
|
Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа |
7,00,7 |
9,21,1 |
|
|
Креатинкиназа |
20,82,1* |
36,26,5* |
|
|
* Р < 0,05; *** Р < 0,0001. П р и м е ч а н и е. То же, что в таблице 1. |
Активность гликолитических ферментов -- фруктозобифосфат-альдолазы и лактатдегидрогеназы -- у бычков II группы оказалась выше, чем в контроле. Повышенная активность этих двух ферментов гликолиза у бычков II группы по сравнению с контролем объясняется тем, что обеспеченность метаболизма незаменимыми аминокислотами обусловливает определенную напряженность биоэнергетических процессов, связанных с образованием дополнительного количества АТФ для активации биосинтеза белков и липидов мышечной ткани. Одним из источников синтеза АТФ является гликолиз, что закономерно ведет к повышению активности ферментов, в том числе фруктозобифосфатальдолазы и лактатдегидрогеназы (см. табл. 3).
Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа катализирует первую окислительную реакцию пентозофосфатного цикла. Окислительные реакции служат основным источником НАДФ в клетках, необходимого для синтеза жиров. Как следует из данных таблицы 3, высокая активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы у бычков II группы по сравнению с контролем сопровождалась повышенным отложением липидов в мышечной ткани. Об этом свидетельствуют и данные прямого калориметрического анализа образцов мышц: у бычков I и II групп в образцах длиннейшей мышцы спины содержание энергии составляло соответственно 21,960,15 и 23,040,32 (разница 4,9 %, Р < 0,01), в пробах туши -- соответственно 24,640,53 и 24,730,27 кДж/г сухого вещества.
Таким образом, при интенсивном доращивании и откорме бычков черно-пестрой породы улучшение обеспеченности аминокислотами в результате применения кормов с пониженной распадаемостью протеина в рубце и сбалансированного рациона способствует снижению теплопродукции (на 3,35 %), увеличению отложения энергии на прирост живой массы (на 10,22 %) и повышению эффективности использования обменной энергии на прирост живой массы (на 5,87 %) по сравнению с контролем. Проведенные исследования свидетельствуют об актуальности работ по изысканию возможностей повышения биоконверсии питательных веществ корма в компоненты продукции и улучшения качества последней посредством направленной регуляции метаболизма и биосинтеза.
Литература
1. Е р и м б е т о в К.Т. Особенности азотистого обмена и количественные аспекты формирования мышечной ткани у растущих бычков при использовании кормов с пониженной распадаемостью в рубце протеина и крахмала. Мат. Междунар. науч.-практ. конф. (Оренбург). Вест. мясного скотоводства, 2003: 64-72.
2. L u d d e n P.A., K e r l e y M.S. Amino acid and energy interrelationships in growing beef steers: effects of energy intake and metabolizable lysine supply on growth. J. Anim. Sci., 1998, 76: 3157-3168.
3. B o d i n e T.N., P u r v i s H.T. Effects of supplemental energy and/or degradable intake protein o performance, grazing behavior, intake, digestibility, and fecal and blood indices by beef steers grazed on dormant native tallgrass prairie. J. Anim. Sci., 2003, 81: 304-317.
4. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных. Справ. пос. Крупный рогатый скот /Под ред. А.П. Калашникова, Н.И. Клейменова, В.В. Щеглова. М., 1994, 1.
5. Методы биохимического анализа /Под общ. ред. Б.Д. Кальницкого. Боровск, 1997: 165-194.
6. Л а к и н Г.Ф. Биометрия. М., 1980.
7. Л и п с к а я Т.Ю. Физиологическая роль креатинкиназной системы: эволюция представлений. Биохимия, 2001, 2: 149-166.
8. Е р и м б е т о в К.Т., Ш а р и е в а Д.И., П ь я н к о в а Е.В. и др. Метаболизм азотистых веществ и количественные аспекты синтеза и распада мышечных белков у растущих бычков при введении в рацион комплексной кормовой добавки. Тр. ВНИИФБиП с.-х. животных. Боровск, 2004, 43: 159-175.