Статья: Интраназальное введение бактериофага Staphylococcus phage CH1 при индивидуальном и групповом содержании обезьян

Как показано в таблице 4, у троих из четырех обезьян был выделен золотистый стафилококк и представлен широкий спектр литической активности бактериофага Staphylococcus phage CH1.

На дату начала опыта у всех животных проводили оценку наличия S. aureus микробиологическими методами. Далее оценку выполняли на второй и пятый дни введения бактериофага, а также через 3, 6 и 10 дней после окончания введения очищенных фаголизатов.

До введения бактериофага S. aureus высевался только у детеныша под номером 45903 (исходно

S.aureus был выявлен у трех из четырех животных в назальном соскобе). С начала интраназального введения бактериофага СН1 количество колоний с положительной реакцией на лецитовителлазу у обезьяны 45903 постепенно уменьшалось.

Данное уменьшение количества колоний с положительной реакцией на лецитовителлазу продолжалось и после окончания введения препарата. На десятый день после последнего введения фаголизата отмечено полное отсутствие роста колоний золотистого стафилококка на желточно-солевом агаре.

Это свидетельствовало о хорошей литической активности бактериофага Staphylococcus phage СН1 и продолжении фаголизиса после окончания введения фаголизата с бактериофагом СН1.

На шестой день после введения бактериофага СН1 у двух других животных из этой группы (35100 и 44866) наблюдался незначительный рост колоний золотистого стафилококка на желточно-солевом агаре, но на десятый день отмечено полное отсутствие роста колоний S. aureus.

Нельзя исключить вероятность носительства данного возбудителя вследствие его передачи во время близкого контакта между особями в группе.

За время проведения эксперимента у самца под номером 38065 S. aureus не был выделен ни из одного образца назального соскоба.

Наличие бактериофага СН1 определяли в назальных соскобах методом ПЦР (табл. 5). До начала эксперимента у всех обезьян ДНК фага CH1 не определялось.

Таблица 5. Результаты ПЦР по выявлению ДНК штамма бактериофага Staphylococcus phage CH1 в назальном соскобе

Table 5. PCR results for DNA detection of bacteriophage strain Staphylococcus phage CH1 in nasal swabs

С начала интраназального введения бактериофага и после окончания введения препарата, специфическая ДНК бактериофага СН1 детектировалась у всех животных.

С учетом отсутствия роста колоний стафилококка на средах можно сделать заключение о сохранении свободной ДНК фага CH1 на слизистой оболочке носа в количестве выше порога чувствительности ПЦР.

О переносимости фаготерапии судили по данным общего клинического и биохимического анализа крови животных и термометрии (рис.).

У самки 35100 и самца 38065 уровень лейкоцитов во все контрольные дни опыта не превышал фоновые показатели, что свидетельствует об отсутствии реакции на введение бактериофага. В целом, Результаты клинического осмотра и общий анализ крови у всех животных в течение всего эксперимента не

Таким образом, проведенное исследование показало эффективность бактериофага Staphylococcus phage СН1 в качестве препарата для элиминации S. aureus из носовой полости обезьян при индивидуальном и групповом содержании животных, его высокую литическую активность, а также способность длительно персистировать в организме животных.

Рис. Изменения общих клинических, биохимических и физикальных показателей у животных в разные дни эксперимента: количество лейкоцитов - WBC; ректальная температура - T (°C); С-реактивный белок - CRB; скорость оседания эритроцитов - ESR; гематокрит - HCT; количество эритроцитов - RBC Fig. Changes in general clinical, biochemical and physical parameters in animals on different days of the experiment: the number of leukocytes - WBC; rectal temperature - T (°C); C-reactive protein - CRB; erythrocyte sedimentation rate - ESR; hematocrit - HCT; erythrocyte count - RBC

ПЦР позволила обнаружить персистирование ДНК бактериофага после завершения введения препарата при отрицательном результате посева для выделения бактерии - мишени, а также при отсутствии микробиологически детектируемого штамма фага Staphylococcus phage CH1, что может свидетельствовать о защитной роли бактериофага при хроническом реинфицировании бактериями из окружающей среды.

Список литературы

1. Асланов, Б. И., Зуева Л. П., Кафтырева Л. А., Бойцов А. Г., Акимкин В. Г., Долгий А. А. Рациональное применение бактериофагов в лечебной в противоэпидемической практике. Федеральные клинические рекомендации. М. : Издательство «Ремедиум Приволжье», 2014. 39 с.

2. Sulakvelidze A., Alavidze Z., Morris J. G. Jr. Bacteriophage therapy // Antimicrobal agents and chemotherapy. 2001. Vol. 45, no. 3. C. 649-659. doi: 10.1128/AAC.45.3.649-659.2001.

3. Sillankorva S. M., Oliveira H., Azeredo J. Bacteriophages and their role in food safety // International journal of microbiology. 2012. Vol. 2012. Article 863945. doi: 10.1155/2012/863945.

4. Housby J. N., Mann N. H. Phage therapy // Drug discovery today. 2009. Vol. 14, no. 11-12. C. 536-540. doi: 10.1016/j.drudis.2009.03.006.

5. Зуева Л. П., Асланов Б. И., Долгий А. А., Гончаров А. Е., Архангельский А. И. Бактериофаги - факторы эволюции госпитальных штаммов и средства борьбы с инфекциями // Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы. 2012. № 1. С. 9-13. URL: https://epidemiology-journal.ru/ru/archive/artide/11406.

6. Габидуллин З. Г., Габидуллин Ю. З., Ахтариева А. А., Алсынбаев М. М., Мамбетова Э. Ф., Туйгунов М. М., Гашимов Д. Т., Билалов С. Ф., Гибазов Н. Н., Ахмадеев Р. М., Булгаков А. К. Характеристика свойств определяющих, персистенцию моно- и ассоциированных культур условно-патогенных энтеробактерий // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2006. № 4. С. 62-64.

7. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств (Иммунобиологические лекарственные препараты). Часть вторая. Тула : Гриф и К, 2013. 536 с.

8. Hyman P., Abedon S. T. Bacteriophage host range and bacterial resistance // Advances in applied microbiology. 2010. Vol. 70. С. 217-248. doi: 10.1016/S0065-2164(10)70007-1.

9. Дроздова О. М., Брусина Е. Б. Применение бактериофагов в эпидемиологической практике: взгляд через столетие // Эпидемиология и инфекционные болезни. 2010. Т. 15, № 5. С. 20-24. URL: https://rjeid.com/1560- 9529/article/view/40456.

References

1. Aslanov B. I., Zueva L. P, Kaftyreva L. A., Boitsov A. G., Akimkin V. G., Dolgiy A. A. Rational use of bacteriophages in medical and anti-epidemic practice. Federal clinical guidelines. Moscow : Publishing house «Remedium Privolzh'e», 2014. 39 p. (In Russ.).

2. Sulakvelidze A., Alavidze Z., Morris J. G. Jr. Bacteriophage therapy. Antimicrobal agents and chemotherapy. 2001; 45 (3): 649-659. doi: 10.1128/AAC.45.3.649-659.2001.

3. Sillankorva S. M., Oliveira H., Azeredo J. Bacteriophages and their role in food safety. International journal of microbiology. 2012; 2012: 863945. doi: 10.1155/2012/863945.

4. Housby J. N., Mann N. H. Phage therapy. Drug discovery today. 2009; 14 (11-12): 536-540. doi: 10.1016/j.drudis.2009.03.006.

5. Zueva L. P. Aslanov B. I., Dolgiy A.A., Goncharov A. E., Arkhangelsky A. I. Bacteriophages are factors for evolution of nosocomial strains and means for combating infections. Topical issues. 2012; (1): 9-13. URL: https://epide- miology-journal.ru/ru/archive/article/11406. (In Russ.).

6. Gabidullin Z. G., Gabidullin Yu. Z., Akhtarieva A. A., Alsynbaev M. M., Mambetova E. F., Tuigunov M. M., Gashimov D. T., Bilalov S. F., Gibazov N. N., Akhmadeev R. M., Bulgakov A. K. Characteristic of properties determining the persistense of mono- and associated cultures of conditionally pathogenic enterobacteria. Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology. 2006; (4): 62-64. (In Russ.).

7. Guidelines for conducting preclinical studies of medicinal products (Immunobiological medicinal products). Part two. Tula : Grif and K, 2013. 536 p. (In Russ.).

8. Hyman P., Abedon S. T. Bacteriophage host range and bacterial resistance. Advances in applied microbiology. 2010; 70: 217-248. doi: 10.1016/S0065-2164(10)70007-1.

9. Drozdova O. M., Brusina Ye. B. Use of bacteriophages in epidemiological practice: a view after a century. Epidemiology and infectious diseases. 2010; (5): 20-24. URL: https://rjeid.com/1560-9529/article/view/40456. (In Russ.).