10
Распространенность микотоксинов в Кагальницком и Ремонтненском районах Ростовской области, а также их влияние на организм лабораторных животных
М.В. Гунько, Е.А. Сазонова, А.С. Авраменко
Аннотация
Актуальность. В статье освещены данные исследований концентраций микотоксинов в кормах и их основное влияние на организм лабораторных животных (кроликов) при скармливании им корма, заведомо превышающего все нормы МДУ по микотоксинам. Качество скармливаемых кормов для животных имеет достаточно большое значение для общего состояния всех систем организма, особенно это касается продуктивных животных. Объект. Проведены исследования по скармливанию кормов с заведомо превышающими нормы ПДК по микотоксинам на лабораторных животных (кролики). Материалы и методы. Для исследования нами были рассмотрены общие статистические данные встречаемости микотоксикозов в хозяйствах Ростовской области, занимающихся разведением крупного рогатого скота, а также проведены собственные исследования по их клиническому проявлению на лабораторных животных (кролики), в количестве 25 животных, поделенных на 5 групп: 4 опытные и 1 контрольная, по 5 животных в каждой группе. Исследования корма выполнялись методом иммуноферментного анализа (ИФА), разработанного сотрудниками лаборатории микологии ВНИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (Кононенко, Буркин, Ерошкин). Исследования проводили в соответствии с ГОСТ Р 52471-2005. Результаты и обсуждение. Представлены результаты исследования кормов из животноводческих хозяйств Кагальницкого и Ремонтненского районов Ростовской области, а также контроль скармливания кормов кроликам с завышенными показателями нахождения в них микотоксинов и проявления основных клинических признаков. Ключевые слова: микотоксикозы, токсины, кролики, клинические признаки микотоксикозов, аспергилловые токсины, фузариевые токсины, пеницилловые токсины.
Abstract
The prevalence of mycotoxins in the Kagalnitsky and Remontnensky districts of the Rostov region, as well as their effect on the body of laboratory animals
M. V. Gunko, E. A. Sazonova, A. S. Avramenko
Relevance. The article highlights the data of studies of the concentrations of mycotoxins in feed and their main effect on the body of laboratory animals (rabbits) when feeding them feed that obviously exceeds all the norms of the MDU for mycotoxins. The quality of animal feed is quite important for the general condition of all body systems, especially for productive animals. An object. Studies have been conducted on feeding feeds with obviously exceeding the norms of MPC for mycotoxins on laboratory animals (rabbits). Materials and methods. For the study, we reviewed general statistical data on the occurrence of mycotoxicoses on farms in the Rostov region engaged in cattle breeding, as well as conducted our own studies on their clinical manifestation on laboratory animals (rabbits), in the amount of 25 animals divided into 5 groups of 4 experimental and 1 control, 5 animals in each group. The studies of the feed were carried out by the method of enzyme immunoassay (ELISA), developed by the staff of the Laboratory of Mycology at the Institute of Veterinary Sanitation, Hygiene and Ecology (Kononenko, Burkin, Eroshkin). The studies were carried out in accordance with GOSTR 52471-2005. Results of the discussion. The results of the study of feed from livestock farms of the Kagalnitsky and Remontnensky districts of the Rostov region are presented. Also, the control of feeding feed to rabbits with overestimated indicators of mycotoxins in them and the manifestation of the main clinical signs. Key words: mycotoxicoses, toxins, rabbits, clinical signs, aspergillus toxins, fusarium toxins, penicillic toxins.
Введение
На данный момент микотоксикозы и связанные с ними проблемы, возникающие в хозяйствах, далеко не редкость.
Микотоксикозы - это обширная группа неинфекционных заболеваний человека и животных, вызванных интоксикацией микотоксинами (токсинами микромицетов), которые проникли в организм различными путями (основной путь -- алиментарный, то есть с продуктами питания) [3, 7]. Проявляются в острой и хронической формах. Как известно, для хорошего роста развития микромицетов необходима достаточная влажность - не ниже 10 %, и температурный режим от 25 до 35 0С [6, 10]. Если будет отсутствовать хотя бы один из этих факторов, то рост будет заторможен, либо в принципе невозможен. Однако некоторые микромицеты могут переносить низкие температуры, но при этом влажность должна оставаться не ниже 10 %. Так, виды Aspergillus продуцируют охра- токсины в основном в теплых и влажных условиях, тогда как некоторые виды Penicillium могут вырабатывать эти же токсины уже при температуре 5 0С [12].
Трихотеценовый микотоксин Т-2, продуцируемый грибами рода Fusarium, при температуре 4-15 0С (оптимальная температура 8 0С), в то время как мицелий продуцирующих его грибов максимально развивается при температуре 20 0С [1, 4].
В данной статье мы рассмотрим распространение микотоксинов и их основное влияние на организм лабораторных животных (кроликов) при скармливании им корма, заведомо превышающего все нормы МДУ по микотоксинам [5].
Материалы и методы
Для исследования нами были рассмотрены общие статистические данные встречаемости микотоксикозов в хозяйствах Ростовской области, занимающихся разведением крупного рогатого скота, а также проведены собственные исследования по их клиническому проявлению на лабораторных животных (кролики), в количестве 25 животных, поделенных на 5 групп: 4 опытные и 1 контрольная, по 5 животных в каждой группе.
Исследования корма выполнялись методом иммуноферментного анализа (ИФА), разработанного сотрудниками лаборатории микологии ВНИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (Кононенко, Буркин, Ерошкин).
Исследования проводили в соответствии с ГОСТ Р 52471-2005 [3].
В исследуемых кормах (ячмень, кукуруза, зерносмесь и пшеница) нами проводились определения:
1. трех аспергилловых токсинов (афлатоксин В1(АфВ1), стеригматоцистин (СТЕ), охратоксин А(ОА));
2. четырех фузариевых токсинов (Т-2 токсин(Т-2), фумонизин В1(ФУМ), зеараленон (ЗЕН), дезоксиниваленол (ДОН);
3. одного пенициллового токсина - цитринин (ЦИТ).
Результаты и обсуждение
На базе лаборатории инфекционной патологии СКЗ- НИВИ нами были исследованы 2 пробы ячменя, 2 пробы кукурузы, 2 пробы пшеницы, 2 пробы зерносмеси из Кагальницкого и Ремонтненского районов Ростовской области.
Таблица 1 - Показатели нахождения микотоксинов в исследованных кормах
Таким образом, из вышеприведенных данных таблицы мы видим превышение по двум фузариотоксинам (зеараленон, фумонизин В1) в преимущественном проценте по всем пробам.
Также было превышение по 7 пробе зерносмеси по фузариотоксину Т- 2 и Цитринину. По всем остальным токсинам пробы корма остались в пределах ПДК.
В ходе исследования лабораторным животным (кроликам), поделенным на 5 групп, по 5 животных в каждой группе, мы скармливали все пробы, заведомо превышающие нормы ПДК по крупному рогатому скоту.
Скармливание корма, пораженного фузариотоксинами, продолжалось до появления клинических признаков микотоксикоза. В среднем скармливание пораженного корма для 5 групп животных заняло 1 неделю.
Каждой группе скармливалась зерносмесь с определенным микотоксином (Дезоксиниваленол (ДОН), фумонизин В1, Т-2 и цитринин), последней пятой группе была скормлена смесь из корма со всеми токсинами.
Таблица 2 - Распределение лабораторных животных по группам скармливаемого токсина n=25
|
Группа / Group |
Вид скармливаемого токсина / The type of toxin being fed |
|
|
I группа(опыт) / |
Дезоксиниваленол (ДОН) / |
|
|
I group (experience) |
Deoxynivalenol (DON) |
|
|
II группа(опыт) / |
Фумонизин В1 / |
|
|
II group (experience) |
Fumonisin B1 |
|
|
III группа(опыт) /III group (experience) |
Т-2 |
|
|
IV группа(опыт) / |
Цитринин / |
|
|
IV group (experience) |
Citrinin |
|
|
V группа (контроль) / |
Смесь токсинов / |
|
|
V group (control) |
Mix of toxins |
На протяжении всего эксперимента за всеми пятью группами лабораторных животных производился мониторинг их общего состояния, отбор крови для общего и биохимического исследования с дальнейшей фиксацией этих показателей в амбулаторных журналах проведения исследования. микотоксикоз иммуноферментный животноводческий
Снятие показателей производили 3 раза: до опыта, на 4 день опыта и по окончании скармливания токсинов (7 день опыта). В конце опыта у павших животных было проведено вскрытие для оценки влияния токсинов на органы и системы организма.
Проведением исследования общего состояния лабораторных животных на протяжении всего опыта было проведено по схеме:
1. клинические проявлениями микотоксикозов (симптомы);
2. общий клинические исследования (температура, пульс, дыхание);
3. взятие проб крови для общеклинического исследования крови;
4. патологоанатомическая оценка изменения внутренних органов павших животных в ходе проведенного опыта.
Данные, полученные при проведении исследования, позволили нам ориентироваться в ходе проведенного опыта, и понимать, насколько сдвинулись все показатели в ходе работы.
Таблица 3 - Общий клинический осмотр животных до проведения опыта n=25
|
№ п/п |
Группы / Group |
Температура / Temperature (С0) |
Пульс / Pulse (уд/мин) |
Количество дыхательных движений / Number of breathing movements (дых.дв. /мин) |
|
|
1 |
Опытная группа I (Experimental Group I) |
39,2±0,4 |
180±5 |
46±3 |
|
|
2 |
Опытная группа II (Experimental GroupII) |
38,9±0,3 |
200±2 |
38±4 |
|
|
3 |
Опытная группа III (Experimental Group III) |
39,1±0,5 |
220 |
41±2 |
|
|
4 |
Опытная группа IV (Experimental Group IV) |
38,7±0,1 |
190±5 |
33±5 |
|
|
5 |
Контрольная группа V (Control group V) |
38,5±0,2 |
205±5 |
37±3 |
Таблица 4 - Общий клинический осмотр животных на 4 день опыта n=25
|
№ п/п |
Группы / Group |
Температура / Temperature (С0) |
Пульс / Pulse (уд/мин) |
Количество дыхательных движений / Number of breathing movements (дых.дв. /мин) |
|
|
1 |
Опытная группа I (Experimental Group I) |
39,8±0,2 |
205±5 |
77±2 |
|
|
2 |
Опытная группа II (Experimental Group II) |
39,5±0,3 |
210±6 |
68±6 |
|
|
3 |
Опытная группа III (Experimental Group III) |
39,1±0,5 |
215±3 |
65±4 |
|
|
4 |
Опытная группа IV (Experimental Group IV) |
38,9±0,4 |
200±4 |
78±2 |
|
|
5 |
Контрольная группа V (Control group V) |
38,9±0,9 |
230±3 |
90±5 |
Таблица 5 - Общий клинический осмотр животных по окончании скармливания корма, зараженного микотоксинами n=25
|
№ п/п |
Группы / Group |
Температура / Temperature (С0) |
Пульс / Pulse (уд/мин) |
Количество дыхательных движений / Number of breathing movements (дых.дв. /мин) |
|
|
1 |
Опытная группа I (Experimental Group I) |
39,5±0,1 |
250±2 |
80±6 |
|
|
2 |
Опытная группа II (Experimental Group II) |
39,4±0,5 |
249±5 |
78±5 |
|
|
3 |
Опытная группа III (Experimental Group III) |
39,0±0,4 |
222±2 |
67±7 |
|
|
4 |
Опытная группа IV (Experimental Group IV) |
39,0±0,2 |
245±3 |
70±4 |
|
|
5 |
Контрольная группа V (Control group V) |
39,9±0,1 |
313±4 |
100±5 |
Из данных таблиц 3-5 мы можем наблюдать, что общее состояние животных по основным показателям начало изменяться уже на 4 день во всех опытных группах. По окончании скармливания кормов у всех групп наблюдали незначительное повышение температуры, учащение пульса и дыхания. Наибольшее изменение норм показателей ТПД наблюдалось в контрольной пятой группе, которой скармливалась смесь по кормам с микотоксинами.
Результаты проведения общего исследования крови. Взятие проб крови у всех пяти групп проводилось до начала проведения опыта, на 4 день опыта и по окончании скармливания кормов на 7 день (завершение опыта). Отбор крови проводили из краевой ушной вены в области латерального края уха. Кролик нами был зафиксирован в естественном положении. На месте прокола нами, при помощи тупоконечных изогнутых ножниц, был выстрижен шерстный покров. Перед проколом нами была вызвана дополнительно артериальная гиперемия уха, при помощи растирания ушной раковины ксилолом - для улучшения притока крови. Место прокола мы обрабатывали 70% этиловым спиртом. Основание уха слегка прижимали пальцами левой руки, а правой делали надрез краевой вены лезвием скальпеля ближе к кончику уха. Выступающую кровь собирали в заранее подготовленные стерильные пробирки. В ходе проведения общего исследования крови всех 5 групп исследуемых животных, были обнаружены изменения на 4 и 7 день (конец проведения опыта).
Таблица 6 - Результаты проведения исследования общего анализа крови до проведения опыта m=25
|
Показатель / Indicator |
Г |
группа / Group |
Нормы/ Norms |
||||
|
Опытная группа I (Experimental group I) |
Опытная группа II (Experimental group II) |
Опытная группа III (Experimental group III) |
Опытная группа IV (Experimental group IV) |
Контрольная группа V (Control group V) |
|||
|
Лейкоциты White blood cells, 109л |
7±1,7 |
5±0,9 |
10±1,0 |
9±1,8 |
5±0,9 |
5-11 |
|
|
Эритроциты (Red blood cells), 1012л |
5±0,5 |
6±0,6 |
7±0,8 |
5±0,4 |
6±1 |
5-8 |
|
|
Гемоглобин (Hemoglobin), г/л |
110±3,2 |
124±5,1 |
132±6,4 |
121±4,5 |
115±6,3 |
80-150 |
|
|
СОЭ (ESR), мм/час |
1±0,06 |
2±0,02 |
1±0,04 |
2±0,08 |
2±0,05 |
1-2 |