По данным стереологического анализа, у животных контрольной группы средние относительные объемы (волюметрические фракции), занимаемые в железе фолликулярным и интерфолликулярным эпителием, а также коллоидом составляют 25,9 ± 1,12, 13,5 ± 0,97 и 32,0± 1,08% соответственно. Соотношения фолликулярного и интерфолликулярного эпителия (показатель степени организации эпителия в фолликулы) и эпителия (всего) и коллоида (показатель активности щитовидной железы) составляют соответственно 1,9 ± 0,05 и 1,2 ± 0,13. Указанные выше показатели находятся в пределах величин, описанных в литературе [Быков В.Л. 1976, 1979, 2001; Юкина Г.Ю., Быков В.Л., 2004; Delverdier M. et al., 2001; Malendowicz L.K., Woznicki G., 1986].
Введение ПМГ, в целом, не приводило к резким изменениям в фолликулярной организации и структурно-функциональной зональности долей щитовидной железы. Между тем, по данным морфометрического анализа, ПМГ вызывал почти 2кратное увеличение относительного объема тиреоидного эпителия при одновременном снижении волюметрической фракции коллоида в 1,4 раза. Эти сдвиги указывают на усиление процессов резорбции тиреоидного коллоида, т.е. на повышение функциональной активности щитовидной железы в целом, поскольку активация резорбции коррелирует с повышенной секрецией тиреоидных гормонов [Быков В.Л., 1979; Хмельницкий О.К., 1993]. Соотношение волюметрических фракций тиреоидного эпителия и коллоида после введения ПМГ увеличивалось в 2,7 раза, а фолликулярного и интерфолликулярного эпителия - значимо не менялось.
Активация тиреоидного эпителия под влиянием ПМГ, выявленная в проведенном исследовании, сочеталась с выраженной статистически значимой митогенной реакцией (МИ нарастал в 1,6 раза с 0,81± 0,07 до 1,32 ± 0,15 ‰). Полученные в нашем исследовании данные об уровне митотической активности в эпителии щитовидной железы лежат в пределах величин, приведенных в работах различных авторов. [Павлов А.В. 1992; Павлов А.В., Антипанова Е.М., 1988; Романов Ю.А., Степанова Л.И., 1974; Bybee A., Tuffery A.R., 1989; Conde E. et al., 1992; Kimura T. et al., 2001]. Нарастание пролиферативной активности тироцитов обычно сочетается с усилением функциональной активности щитовидной железы, что отмечено и в проведенном нами исследовании.
Гистохимическое исследование выявило высокую активность НАДН-диафоразы, СДГ, ЛДГ в цитоплазме тироцитов, что согласуется с результатами ранее выполненных работ [Быков В.Л., 1976; Клечиков В.З., Плинер Л.И., 1974; Юкина Г.Ю., Быков В.Л., 2001; Arvy L., 1971; Lindsay S., Jenks P.R., 1961].
Характер распределения продуктов реакций в тироцитах не менялся под влиянием ПМГ, однако уже при визуальной оценке отмечалось нарастание активности изученных ферментов. Описанный эффект подтвержден результатами цитофотометрического анализа, которое выявило статистически значимое увеличение интенсивности гистохимических реакций, максимально выраженное для НАДНдиафоразы (в 1,7 раза), умеренно - для ЛДГ (в 1,5 раза) и минимально - для СДГ (в 1,3 раза). Нарастание активности исследованных ферментов указывает на стимулирующее влияние ПМГ на метаболизм и функцию тиреоидного эпителия [Быков В.Л.,1976; Клечиков В.З., Плинер Л.И., 1974; Юкина Г.Ю., Быков В.Л., 2001; Arvy L., 1971; Lindsay S., Jenks P.R., 1961].
Таким образом, в целом полученные морфометрические и гистохимические данные свидетельствуют об активации тиреоидного эпителия и железы под действием ПМГ. Эти выводы согласуются со сведениями об усиленной секреции тиреоидных гормонов у животных, получавших ПМГ [Мурзина Н.Б. и др., 1991], а также о том, что введение ПМГ нивелирует угнетающее влияние стресса на уровни тиреотропного и тиреоидных гормонов [Тимошин С.С. и др., 1997]. Морфофункциональных исследований влияния ПМГ на тиреоидный эпителий или щитовидную железу в целом ранее не проводили. Описанное действие ПМГ может объясняться как его прямым влиянием на тироциты, так и влиянием, опосредованным через гипофиз, о чем говорит зарегистрированное ранее воздействие ПМГ на уровни ТТГ.
ПМГ, вероятно, является одним из элементов сложной регуляторной системы нейропептидов, которая контролирует различные функции клеток щитовидной железы - пролиферацию, дифференцировку, функциональную активность, опухолевый рост [Costamagna M.E. et al., 2002; Lenziardi M. et al., 1995; Paez Pereda M. et al., 2000; Raspe E. et al., 1991;Tseng Y.C. et al., 1993; Tsuzaki S., Moses A.C., 1990]. При анализе влияния ПМГ и других нейропептидов на активность тиреоидного эпителия следует учитывать, что гормоны щитовидной железы, в свою очередь, воздействуют на синтез некоторых нейропептидов [Fullerton M.J. et al., 1990], а также оказывают существенное регуляторное влияние на разнообразные функции организма: созревание и дифференцировку клеток и тканей, секрецию факторов роста, гормонов и цитокинов, активность метаболизма и др. [Harvey C.B., Williams G.R., 2002; Hulbert A.J., 2000].
Заключение
ВЫВОДЫ.
1. По данным гистологического, морфометрического, количественного гистохимического и авторадиографического исследования, пептидный морфоген гидры оказывает стимулирующее воздействие на покровные (роговица, язык, пищевод) и железистый (щитовидная железа) эпителии, усиливая их пролиферативную и метаболическую активность, увеличивая толщину эпителиальных пластов и изменяя их цитоархитектонику. Указанные реакции неодинаково выражены в различных эпителиях, а также их отдельных слоях и топографических зонах. Под влиянием пептидного морфогена гидры существенно усиливается гетероморфия и гистоэнзимологическая неоднородность эпителиев.
2. В многослойном плоском неороговевающем эпителии роговицы при воздействии пептидного морфогена гидры происходит увеличение толщины эпителиального пласта (преимущественно за счет шиповатого слоя), которое более выражено в центральной зоне роговицы. Отмечено усиление ДНКсинтезирующей и митотической активности эпителиоцитов, более значительное в периферической зоне роговицы. Пептидный морфоген индуцирует повышение активности НАДН-диафоразы (в базальном слое эпителия) и СДГ (в базальном и шиповатом слоях), которая нарастает от центра к периферии роговицы, не оказывая влияния на активность ЛДГ. Следствием воздействия морфогена явилось возрастание гистоэнзимологической неоднородности с появлением различий в активности ферментов между зонами и слоями внутри пласта.
3. Многослойный плоский ороговевающий эпителий языка после введения пептидного морфогена гидры утолщается (преимущественно за счет шиповатого слоя) - максимально на вентральной поверхности, а также на дорсальной поверхности между нитевидными сосочками языка в отсутствие значимой реакциии в области нитевидных сосочков. После введения морфогена нарастает ДНКсинтезирующая и митотическая активность эпителиоцитов; последняя наиболее высока на вентральной поверхности языка, менее выражена в эпителии между сосочками и не меняется в области сосочков. Активность СДГ, ЛДГ и НАДНдиафоразы более резко нарастает в эпителии вентральной поверхности языка и на дорсальной поверхности между сосочками языка; в области сосочков изменения активности ЛДГ и СДГ менее выражены, а НАДНдиафоразы - отсутствуют. Под влиянием пептидного морфогена возникают различия в активности НАДНдиафоразы и ЛДГ в эпителии, расположенном на вентральной и дорсальной поверхностях языка.
4. Многослойный плоский ороговевающий эпителий пищевода под действием пептидного морфогена гидры утолщается (преимущественно за счет шиповатого слоя), что сочетается с увеличением его митотической активности. Морфоген вызывает также повышение активности исследованных ферментов: НАДН-диафоразы и СДГ - в базальном и шиповатом слоях, а ЛДГ - в шиповатом слое. При этом под влиянием морфогена появляются различия в активности ферментов между базальным и шиповатым слоями эпителия, которые отсутствовали в контрольной группе.
5. В щитовидной железе введение пептидного морфогена гидры вызывает значительное увеличение относительного объема (волюметрической фракции) тиреоидного эпителия при одновременном снижении относительного объема его секреторного продукта - интрафолликулярного коллоида, что приводит к резкому увеличению их соотношения, которое служит показателем активности щитовидной железы. Соотношение волюметрических фракций фолликулярного и интерфолликулярного эпителия (показатель степени фолликулярной организации железы) значимо не менялось. Морфоген вызывает также значимое нарастание пролиферативной активности тироцитов и увеличение активности ферментов НАДН-диафоразы, СДГ и ЛДГ в их цитоплазме.
Практические рекомендации.
Выявленное стимулирующее влияние пептидного морфогена гидры на пролиферативную и метаболическую активность эпителиев может лежать в основе разработки средств для стимуляции регенерации эпителиев после их повреждения. Напротив, блокирование действия пептидного морфогена гидры с помощью его антагонистов может препятствовать избыточное разрастание эпителия, например, при гиперпластических процессах и опухолевом росте. Сведения о влиянии пептидного морфогена гидры на морфофункциональное состояние эпителия различных органов целесообразно использовать в учебном процесс на кафедрах гистологии, цитологии и эмбриологии, патологической анатомии и патологической физиологии.
Литература
1. Кулаева В.В., Лебедько О.А., Рубина А.Ю. и др. Влияние пептидного морфогена гидры на поддержание структурного гомеостаза в норме и при стрессе // Тезисы II съезда физиологов Сибири и Дальнего Востока. - Новосибирск: Изд-во НГМИ, 1995. - С. 242.
2. Быков В.Л., Кулаева В.В. Гистохимическая характеристика эпителия ро-говицы при введении пептидного морфогена гидры // Бабухинские чтения в Ор-ле. Материалы 5 Всероссийской конференции. - М.: Изд-во ЗАО «Ретиноиды», 2006. - С. 67-68.
3. Быков В.Л., Кулаева В.В. Влияние пептидного морфогена гидры на структурно-метаболические характеристики в эпителиальной ткани роговицы // Материалы II Международного эмбриологического симпозиума «Югра-Эмбрио - 2006». Научный вестник Ханты-Мансийского Государственного медицинского института. 2006. - №2. - С. 27 - 28.
4. Кулаева В.В., Быков В.Л. Топографические особенности изменения эпителия языка после введения пептидного морфогена гидры: морфометрическая характеристика // Морфология. - 2006. - Т. 129, вып. 4. - С.72.
5. Кулаева В.В., Быков В.Л. Реакция эпителия на пептидный морфоген гидры: гистологический и количественный гистоэнзимологический анализ // В кн.: Современные проблемы морфологии - СПб: Изд-во СПб., отд. ВНОАГЭ. - 2006. - вып. 1. - C. 58 - 59.
6. Кулаева В.В., Быков В.Л. Гистоэнзимологическая характеристика эпи-телия роговицы при воздействии пептидного морфогена гидры // В кн.: Акту-альные вопросы эволюционной, возрастной и экологической морфологии. -Белгород: Изд-во БелГУ. - 2006. - C. 95.
7. Кулаева В.В., Быков В.Л. Морфометрическая и гистохимическая оценка изменений эпителия пищевода при воздействии пептидного морфогена гидры // В. кн. Актуальные проблемы морфологии. - Минск: Изд-во БГМУ. - 2006. - С. 89 - 90.
8. Кулаева В.В., Быков В.Л. Морфометрическая и гистохимическая характеристика эпителия языка при введении пептидного морфогена гидры // Морфо-логия. - 2006. - Т. 129, вып.5. - С. 56.
9. Кулаева В.В., Быков В.Л. Морфометрическое и гистохимическое исследование эпителия роговицы при введении пептидного морфогена гидры // В. кн.: Актуальные вопросы современной морфологии и физиологии. - СПб: Изд-во ДЕАН. - 2007. - С. 255 - 256.
10. Кулаева В.В., Быков В.Л. Количественный анализ структурных и метаболических изменений эпителия языка при введении пептидного морфогена гидры // Морфология. - 2007. - Т. 131, вып. 3. - C. 78.
11. Кулаева В.В., Быков В.Л. Морфофункциональная характеристика эпителия языка при введении пептидного морфогена гидры // Морфология. - 2007. - Т. 131, вып. 3. - С. 41 - 44.