Материал: 1327
I2 + 2Na2S2O3 = 2NaI + Na2S4O6.
Предел обнаружения растворенного кислорода по этому методу
составляет 0,05 |
мг/дм3. |
|
Оборудование, реактивы: |
||
1) |
склянки с притертой пробкой на 120 см3; |
|
2) |
пипетки на 1 см3, 2 см3; |
|
С |
|
|
3) |
конические колбы на 250 см3; |
|
4) |
бюретка для титрования; |
|
5) |
сульфат |
ли хлорид марганца (II) раствор. Для приготовления |
раствора 200 г MnSO4∙2H2O (или 240 г MnSO4∙4H2O, или 182 г
кислойMnSO4∙H2O, ли 212,5 г MnCl23∙4H2O) растворяют в дистиллированной воде доводят объем до 0,5 дм . Фильтруют через бумажный фильтр. В
среде при до авлении KI разбавленный раствор не должен
выделять свободного йода;
дист лл рованной воды. При подкислении разбавленный раствор не должен выделять йод; ) 250 г NaOH или 350 г KOH растворяют в 250 см3 д ст лл рованной прокипяченной воды (для удаления CO2). Оба
6) щелочнойобъемраствор KI: а) 75 г KI растворяют в 50 см3 8) тиосульфат натрия Na2S2O3∙5H2O, 0,02 н;
раствора смеш вают |
доводят |
до 0,5 дм3; |
|
7) |
серная кислота (пл. 1,84 г/см3), разбавленный раствор 1:1; |
||
9) |
крахмал, 1 %-ный раствор. |
|
|
Материал: вода водоема. |
|
||
Ход работы |
Д |
||
Пробы воды отбираютАв прокалиброванные стеклянные емкости с |
|||
притертой пробкой |
вместимостью |
120 см3. Склянки опускают на |
|
глубину 0,5 м, вынимают и сразу закрывают пробкой, чтобы под пробкой не образовались пузырьки воздуха. После этого сразу же на месте отбора фиксируют кислород, для чегоИв склянки при помощи пипетки на 1 см3, погружая ее до дна, вносят 1 см3 раствора MnSO4 или MnCl2. Другой такой пипеткой в верхнюю часть склянки вносят 1 см3 щелочного раствора KI. Излишек жидкости из склянки стекает через край на подставленную чашку Петри. Склянку осторожно закрывают пробкой, слегка наклонив ее, при этом из склянки выливают 2 см3 исследуемой воды, т. е. столько, сколько налили реактивов. В склянке не должно оставаться пузырьков воздуха. Склянка не должна оставаться открытой. Затем жидкость перемешивают перевертыванием.
Перед титрованием (осадок должен хорошо осесть) приливают 2 см3H2SO4 (1:1). Раствор H2SO4 вносят пипеткой в нижнюю часть склянки, при этом часть жидкости переливается через край. Закрывают склянку пробкой по тем же правилам и перемешивают до растворения осадка Mn(OH)3.
21
После этого всю пробу переливают в коническую колбу для титрования вместимостью 250 см3 и титруют 0,02 н раствором тиосульфата натрия при непрерывном помешивании до слабо-желтого цвета, после чего прибавляют 1 см3 раствора крахмала и титруют до исчезновения синей окраски.
Расчет содержания растворенного кислорода в воде X (мг/дм3) |
||||||||
С |
|
|
|
|
|
|
||
производится по формуле |
|
|
|
|||||
|
|
|
|
X |
A H 8 1000 |
, |
|
|
|
|
|
|
|
V1 V2 |
|
|
|
реактивов |
|
|
|
|||||
где А – объем т осульфата натрия, пошедшего на титрование, см3; |
|
|||||||
H – нормальностьNa2S2O3 с учетом поправки; |
|
|||||||
V1 |
– объем про ы |
склянке, см3 (120 см3); |
|
|||||
V2 |
– |
объемX |
|
, |
(2 |
|||
|
|
, до авленный до образования Mn(OH)2 |
||||||
см3); |
|
|
|
|
|
|
|
|
1000 – пересчет на 1 дм3; |
соответствующая 1 см3 1 н |
|||||||
8 |
– экв валентная |
масса кислорода, |
||||||
раствора Na2S2O3. |
А |
|
||||||
|
|
|
|
A 0,16 K 1000 |
|
|||
|
|
|
|
|
120 2 |
|
|
|
где К – поправочный коэффициент. |
|
|
|
|||||
|
|
|
|
Д |
|
|||
|
|
Вопросы для защиты лабораторной работы |
|
|||||
|
|
«Определение растворенного в воде кислорода |
|
|||||
|
|
|
|
по методу Винклера» |
|
|||
|
|
|
|
|
И |
|||
1. От каких факторов зависит содержание в воде растворенного |
||||||||
кислорода? |
|
|
|
|
|
|
||
2. |
Каково гигиеническое значение определения растворенного |
в |
||||||
воде кислорода?
3. Какими методами определяют содержание растворенного в воде кислорода? На чем основаны эти методы?
4. Какие существуют нормативы на содержание в воде растворенного кислорода для водоемов различных категорий водопользования?
5. Какие категории водопользования водоемов вам известны?
22
Лабораторная работа № 6
Тест на загрязнение воды тяжелыми металлами
При наличии микроскопаможно использовать тест на загрязнение |
|||
воды ТМ (тяжелымиметаллами) по движению хлоропластов в клетках |
|||
С |
|
|
|
ряски. В нормеони концентрируются со стороны источника света, |
|||
располагаясьперпендикулярно |
лучам |
света |
(положительный |
фототакс с), апри сильном |
загрязнении |
перемещаются хаотически, |
|
приж маясь к боковым стенкам клеток и располагаясь к источнику
рования 10 мкг/дмкобальт3. Ответные реакциина некоторые ТМ довольно специфичны.
светаребром (отр цательный фототаксис). Пробы должны быть приэтом свеж ми, а растен я живыми.
Для б отест |
|
загрязненных, например сточных, водлучше |
брать ряску одного |
да клона (из аквариума, бассейна). |
|
Чувств тельность ряски на загрязнение ТМ (барий, медь,магний, |
||
железо, |
) |
проявляется уже при концентрации порядка |
Так, в ответ на Cu (0,1…0,25 мг/см3) уже через 4 часа воздействия про сход т рассоед нение листецов из групп и изменение окраски с зеленой на голу ую; при воздействии Zn (0,025 мг/см3) – насыщенная зеленаяокраска меняется на есцветную, зеленой остается только точка
роста; Ba (0,1…0,25 мг/см3) – идет полное рассоединение листецов,отпадают корни, зеленая окраска меняется на молочно-белую;
Co (0,25…0,0025 мг/см3) – наблюдается полное приостановлениероста и |
|
потеря окраски. |
А |
Цель работы: провести тест на загрязнение воды ТМ подвижению |
|
хлоропластов в клетках щитков ряски. |
|
Материалы |
и оборудованиеД:микроскоп световой; стекла |
1.Листецы живых растений инфильтруютИ(пропитывают исследуемой жидкостью) с помощью медицинского шприца и ставят на слабый свет (120 лк).
2.Через 17 час после инфильтрации (утром следующего дня)оторванные листецы помещают в каплю исследуемой жидкостина предметное стекло.
3.Под микроскопом (желательно 400-кратное увеличение) вверхних клетках хлоренхимы рассматривают хлоропласты и делают
зарисовки. |
Для количественного анализа просматривают |
неменее |
10 клеток |
и ведут подсчет хлоропластов в каждой |
группепо |
23
расположению к свету («ребром» и перпендикулярно).
4. Не сдвигая опытный препарат, создают сильное освещение в течение 10 мин, а затем снова зарисовывают и(или) пересчитывают хлоропласты в разных положениях.
5. Определяют визуально либо количественно соотношениечисла хлоропластов, расположенных «ребром» к свету, к их первоначальному количеству и выражают показатель в %. Чем онвыше, тем сильнее загрязнена вода ТМ.
6. Контрольный листец помещают в каплю водопроводнойили дист лл рованной воды, в нем соотношение хлоропластов вразных положен ях (показатель торможения фототаксиса)обычно близко к
нулю. |
|
|
С |
|
|
7. делать выводы. |
|
|
Вопросы для защиты лабораторной работы |
||
«Тест на |
|
воды солями тяжелых металлов» |
загрязнение |
|
|
1. Что такое |
отестирование? Какую информацию можно получить с |
|
бА |
||
помощьюэтогометода?
2. Как ионы тяжелых металлов влияют на каталитическую активность ферментов растений?
3. Как зависит проницаемость клеток растения для молекул органического растворителя от состояния клетки?
4. Как оценить степень загрязненияДводы или почвы тяжелыми металлами с помощью проведенного тестирования?
Лабораторная работа № 7
Определение фермента пероксидазы какИпоказателя загрязнения
окружающей среды
Цель работы: оценить загрязненность окружающей среды по ферменту пероксидазы.
Пероксидаза выполняет две функции: пероксидазную (окисляет вещества с участием пероксида водорода) и оксидазную (катализирует окисление субстратов за счет молекулярного кислорода без участия пероксида водорода). В практике широко используют определение активности пероксидазы для оценки метаболизма ростовых веществ, лигнина и других вторичных продуктов обмена при физиологических и патологических процессах.
Реактивы:
1) ацетатный буфер, 0,1 М раствор с рН 5,4;
24
2) пероксид водорода, 0,03%-ный раствор; 3) бензидин, 0,92 г/л раствор на ацетатном буфере*.
Оборудование:
1) Колбы вместимостью 25 см3;
2) |
пипетки вместимостью 5 см3; |
3) |
центрифуга лабораторная с центрифужными весами; |
С |
|
4) |
ФЭК. |
Материал:листья растений, свежие.
Метод основан на непрерывном измерении светопоглощения бенз д новой с ни, образующейся при окислении бензидина под идейств ем перокс дазы.
Реакц я оп сывается уравнением.
Ход работыбАД
Навеску 100 мг растительного материала помещают в ступку и растирают, прибавляя порциями 10 см3 дистиллированной воды.
Растертую массу переносят в мерную колбу вместимостью 25 см3 и доводят водой до метки. Содержимое колбыИнастаивают 10 мин, затем
сливают в центрифужные пробирки и центрифугируют 10 мин при
3000 об/мин.
Для определения активности фермента берут кювету с толщиной слоя 2 см и наливают в нее по 2 см3 водной вытяжки из листьев, ацетатного буфера и раствора бензидина. Ставят кювету в кюветодержатель и устанавливают стрелку прибора на нулевую отметку, затем добавляют 2 см3 раствора пероксида водорода пипеткой с широким носиком (чтобы сильная струя перемешала жидкость в кювете) и одновременно с добавлением пероксида включают секундомер. Раствор в кювете начинает синеть и по мере нарастания интенсивности окраски стрелка прибора отклоняется. Отмечают время от начала приливания раствора пероксида водорода до достижения
25