Материал: metodichka_7

Пленки из фибрина на слизистой оболочке кишечника.

Микробиологическая диагностика. Материал на исследовании: фекалии

1.Бактериологический метод: выделяют на специальных средах чистую культуру, которую тестируют на токсигенность.

2.ПЦР.

3.ИФА (определение токсинов).

Специфическая профилактика и специфическая терапия не разработаны.

4.Характеристика возбудителя столбняка, специфическая профилактика и лечение.

Возбудитель столбняка – Clostridium tetani.

Морфо-тинкториальные свойства: грамположительная тонкая палочка, перитрих, капсулу не имеет. Спора круглой формы, больше диаметра клетки, располагается терминально и придает клетке сходство с барабанной палочкой.

Чистая культура C.tetani. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: анаэробы, растут на соответствующих питательных средах.

Антигенная структура: О- и Н-антигены, по жгутиковому (Н) антигену выделяют 10 сероваров C.tetani.

Факторы патогенности: все серовары возбудителя продуцируют экзотоксин, состоящий из двух фракций: тетаноспазмин (нейротоксин) и тетанолизин. Основ-

ной фактор патогенности – тетаноспазмин, который блокирует все типы синап-

тического торможения. Тетанолизин обладает гемолитическим, кардиотоксическим и летальным действием.

7

Заражение происходит при попадании спор возбудителя с почвой через поврежденные кожные покровы (небольшие царапины, ссадины, проколы на конечностях) и слизистые оболочки вследствие бытовых, производственных и сельскохозяйственных травм. У новорожденных заражение происходит через пупочную ранку.

Патогенез: возбудитель размножается и остается в воротах инфекции (колотые раны). Клиника заболевания развивается только за счет экзотоксина, выделяемого возбудителем. Экзотоксин (тетаноспазмин) проникает в нервные клетки и посредством аксонного транспорта попадает в ЦНС. При этом развивается сначала местное, а затем и генерализованное подавление синаптического торможения на уровне двигательных нейронов, так как токсин препятствует выходу тормозных медиаторов в синаптическую щель. В связи с этим в мионевральных синапсах распространяются только процессы возбуждения. Это приводит к гипертонусу скелетных мышц больного и судорогам.

Клиника: симптомы столбняка развиваются по нисходящему типу (tetanus descendens) и начинаются со спазма жевательной мускулатуры (тризм), затем наступают судороги мимической мускулатуры. Позже судороги переходят на мышцы шеи, туловища и конечностей. Вследствие резкого сокращения мышц спины больной выгибается в виде дуги с опорой на затылок и пятки (опистотонус). Смерть чаще наступает от асфиксии из-за паралича мышц грудной клетки и диафрагмы.

Опистотонус. Картина сэра Чарлза Белла (шотландский физиолог и анатом, член Лондонского королевского общества).

Столбняк новорожденных (tetanus neonatorum). Протекает по типу генерализованной инфекции. Вначале у ребенка нарушается акт сосания и глотания, а затем начинаются судороги. Вследствие резкого сокращения мышц-сгибателей у ребенка отмечается характерная поза.

8

Клиника столбняка у новорожденных.

Микробиологическая диагностика столбняка обычно проводится посмерт-

но.

Материал на исследование берут из предполагаемых ворот инфекции. Бактериологический метод (основной) – посев на среды для анаэробов. Дополнительный метод – бактериоскопия мазков-отпечатков из входных во-

рот инфекции.

Специфическая профилактика:

-плановая (массовая) – столбнячный анатоксин самостоятельно или в составе

АКДС-вакцины, АДС-анатоксина, АДС-м-анатоксина.

-экстренная – проводится при травмах, ранениях, ожогах, обморожениях, укусах животных и др. Если пострадавший был вакцинирован более пяти лет назад или не был вакцинирован, то в одну руку вводят столбнячный анатоксин, а в дру-

гую – противостолбнячный иммуноглобулин человеческий или противостолбнячную антитоксическую сыворотку лошадиную. Если пострадавший был вакцинирован менее 5 лет, то вводят только столбнячный анатоксин.

Специфическое лечение – противостолбнячный иммуноглобулин человеческий или противостолбнячная антитоксическая сыворотка лошадиная.

5.Характеристика возбудителя ботулизма, микробиологическая диагностика, специфическое лечение.

Возбудитель ботулизма – Clostridium botulinum.

Морфо-тинкториальные свойства: грамположительные палочки, перитрихи, капсулы не имеют. Образуют терминально расположенную спору овальной формы (ее диаметр больше диаметра клетки), которая придает палочке сходство с теннисной ракеткой.

9

Чистая культура C.botulinum. Окраска по Граму.

Культуральные свойства. Анаэробы, растут на соответствующих питательных средах.

Антигенная структура: в зависимости от типа продуцируемого токсина, выделяют 8 сероваров возбудителя. Заболевания у человека чаще вызывают серовары

A, B, E и F.

Факторы патогенности: основным фактором патогенности является продуцируемый возбудителем экзотоксин – это самый сильный из бактериальных токсинов, летальная доза для человека – 0,005 мг. Несмотря на антигенные различия, биологическая активность экзотоксинов различных сероваров одинакова. Ботулотоксин является типичным нейротоксином.

Пути заражения:

алиментарный (основной) – при употреблении рыбных, мясных и овощных консервов домашнего приготовления, копченой и вяленой рыбы. У детей младшего возраста заражение может происходить при употреблении меда, соков и сиропов домашнего приготовления;

контактный (встречается редко) – при попадании почвы со спорами возбудителя в рану (раневой ботулизм).

Патогенез: при алиментарном пути инфицирования ботулотоксин всасывается в желудке и в верхних отделах тонкой кишки, с током крови попадает в органы и ткани, вызывая их поражение. Наиболее чувствительна к действию токсина нервная ткань. Токсин блокирует выброс ацетилхолина в синапсах мотонейронов спинного и продолговатого мозга с развитием бульбарного (расстройство глотания и речи) и паралитического синдрома.

Клинические проявления: начало заболевания острое. У больных возникает тошнота, рвота, диарея, затем появляются типичные симптомы: сухость во рту, нечеткость зрения, двоение в глазах (диплопия), опущение верхних век (птоз). Затем присоединяются нарушения глотания и речи. В заключительной стадии происходит расстройство дыхания за счет паралича дыхательной мускулатуры. Смерть наступает от остановки дыхания.

10

Микробиологическая диагностика направлена на обнаружение и определение типа токсина, а также выделение возбудителя.

Материал на исследование: кровь, фекалии, промывные воды желудка, рвотные массы, моча и остатки пищевых продуктов.

1. Определение типа ботулинового токсина:

Классический метод – реакция нейтрализации (РН) на белых мышах (см. учебнометодическое пособие «Учение об инфекции и иммунитете. Основы иммунологии»).

Экспресс-методы – РНГА по Рыцаю, ИФА.

2. Выделение возбудителя:

Бактериологический метод – посев исследуемого материала на соответствующие для анаэробов питательные среды.

Специфическое лечение: до установления типа токсина вводят поливалент-

ную антитоксическую сыворотку типов A, B, E, после установления типа токсина – моновалентную антитоксическую сыворотку.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА.

1.Изучение схемы бактериологического исследования отечной жидкости при подозрении на газовую гангрену.

I этап исследования.

Посев исследуемого материала на регенерированные среды КиттаТароцци, Вильсона-Блера. Посевы инкубируют при 370С 24-48 часов.

II этап исследования.

1.Изучение характера роста на питательных средах, приготовление мазков с окраской по Граму.

2.С целью выделения чистой культуры производят пересев со среды Китта-

Тароцци на кровяной агар Цейсслера. Посевы инкубируют при 370С 24 часа. III этап исследования.

1.Изучение характера роста на среде Цейсслера.

2.С целью определения -токсина (лецитиназа) производят посев чистой куль-

туры на желточный агар. Посевы инкубируют при 370С 24 часа. IV этап исследования.

1.Учет роста на желточном агаре.

2.Вывод (определение вида выделенной культуры).

2.Световая микроскопия готовых препаратов чистых культур бактероидов, возбудителей газовой гангрены, столбняка, ботулизма в окраске по Граму.

11