Занятие № 27
Тема. Микробиологическая характеристика возбудителей спирохетозных инфекций,
риккетсиозов, хламидиозов и микоплазмозов.
Цель занятия. Изучить характеристику возбудителей сифилиса, боррелиозов, леп-
тоспирозов, риккетсиозов, хламидиозов и микоплазмозов, микробио-
логическую диагностику вызываемых ими заболеваний. Освоить ме-
тоды диагностики спирохетозов, хламидиозов и микоплазмозов.
I.Теоретические знания:
1.Характеристика возбудителя сифилиса, микробиологическая диагностика.
2.Характеристика возбудителей боррелиозов, микробиологическая диагностика.
3.Характеристика возбудителей лептоспироза, микробиологическая диагностика,
специфическая профилактика.
4.Возбудитель Ку-лихорадки, диагностика, специфическая профилактика.
5.Характеристика возбудителей сыпного тифа, серодиагностика.
6.Характеристика возбудителей хламидиозов, микробиологическая диагностика.
7.Характеристика микоплазм, вызываемые заболевания, микробиологическая ди-
агностика.
II.Практические навыки:
1.Световая микроскопия готовых препаратов чистой культуры трепонем, борел-
лий, лептоспир в окраске по Романовскому-Гимзе.
1
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ
1. Характеристика возбудителя сифилиса, микробиологическая диагностика.
Возбудитель сифилиса – Treponema pallidum.
Морфо-тинкториальные свойства: извитые бактерии (спирохеты) спиралевидной формы, имеют мелкие равномерные первичные завитки, спор и капсулу не образуют. По Романовскому-Гимзе окрашиваются в бледно-розовый цвет. При неблагоприятных условиях (действие антибиотиков и антител) трепонемы способны сохраняться в виде цист или переходить в L-форму. Подвижность трепонем связана с наличием фибрилл, которые обеспечивают различные виды движения: сгибательное, поступательное, вращательное и др.
Чистая культура Treponema pallidum.
Культуральные свойства: строгие анаэробы, плохо растут на искусственных питательных средах.
Факторы патогенности:
факторы адгезии; факторы инвазии;
цисты и L-формы, способствующие длительной персистенции.
Сифилис – заболевание чаще передаваемое половым путем. Сифилис – «великий» имитатор», так как имеет множество клинических проявлений.
Источник инфекции: больной человек.
Пути заражения: половой, трансплацентарный, интранатальный, трансфузионный, контактно-бытовой.
Патогенез: возбудитель размножается в месте внедрения (слизистые оболочки половых путей, ротовой полости, прямой кишки), мигрирует в регионарные лимфатические узлы (первичный сифилис). Далее, при гематогенном и лимфогенном распространении трепонем, процесс генерализуется (вторичный сифилис). Последую-
2
щее размножение микробов в различных органах приводит к их грубым органическим поражениям (третичный сифилис).
Клинические формы.
Первичный сифилис проявляется формированием в месте внедрения возбудителя твердого шанкра (безболезненной язвы с плотным основанием), увеличением и воспалением регионарных лимфатических узлов (регионарный лимфаденит). Продолжительность течения первичного сифилиса – 6 недель. Затем эти признаки исчезают.
Вторичный сифилис характеризуется появлением на коже и слизистых оболочках розеолезно-папулезных высыпаний и генерализованным лимфаденитом. Эти проявления носят рецидивирующий характер. Продолжительность вторичного сифилиса колеблется от двух до пяти лет.
При отсутствии лечения возникает третичный сифилис. Во внутренних органах и костях наблюдается формирование гумм (висцеральный сифилис). Гуммы – это сифилитические гранулемы в виде плотных узлов, склонных к распаду и рубцеванию.
У пациентов без лечения и также у ВИЧ-инфицированных, может развиться нейросифилис – тяжелое поражение ЦНС (сифилитический менингит, прогрессивный паралич и др.).
При трансплацентарном инфицировании плода от больной матери развивается врожденный сифилис, который подразделяется на ранний (проявляется у детей до 2 лет) и поздний (проявляется у детей старше 2 лет).
Микробиологическая диагностика.
Для выявления возбудителя при первичном и вторичном сифилисе с клиническими проявлениями используют:
1.Бактериоскопический метод (темно-полевая микроскопия);
2.Иммуногистохимическое исследование (ИГХ);
3.ПЦР.
Для выявления антител основным методом диагностики является серологический. Существуют нетрепонемные и трепонемные тесты.
Нетрепонемные тесты: применяют для проведения массового скрининга населения. Это отборочные тесты. Предусматривают использование неспецифического антигена (например, экстракта липидов мышц бычьего сердца, так как он идентичен липоидному антигену трепонем).
Кнетрепонемным тестам относят:
1.Реакцию микропреципитации (РМП);
2.Другие экспресс-тесты: аналоги реакции микропреципетации (RPR, VDRL).
3
Трепонемные тесты – для подтверждения положительных результатов нетрепонемных тестов, но с использованием специфического трепонемного антигена:
1.ИФА;
2.Иммуноблоттинг (модификация ИФА);
3.РИФ;
4.РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем);
5.РПГА (РНГА);
6.ИХЛ (иммунохемилюминесцентное исследование)
Микробиологическая диагностика врожденного сифилиса.
Представляет собой комплекс нетрепонемных и двух трепонемных тестов:
1.Нетрепонемные тесты: РМП, RPR, VDRL;
2.Трепонемные тесты: РПГА, ИФА
Специфическая профилактика и лечение на разработаны.
2.Характеристика возбудителей боррелиозов, микробиологическая диагностика.
Возбудители боррелиозов – Borrelia recurrentis, B.duttoni, B.persica, B.burgdorferi, B.garini, B.afzelii.
Морфо-тинкториальные свойства: извитые бактерии (спирохеты), имеют крупные неравномерные первичные завитки и заостренные концы. Спор, капсул не имеют. Подвижны за счет наличия фибрилл. По Романовскому-Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет.
B.recurrentis в мазке крови больного эпидемическим возвратным тифом.
Культуральные свойства: практически не культивируются на искусственных питательных средах, строгие анаэробы.
4
Антигенная структура боррелий нестабильна и может меняться в течение заболевания.
Факторы патогенности:
1.факторы адгезии;
2.факторы инвазии;
3.эндотоксин;
4.антигенная изменчивость.
Возбудители боррелиоза Лайма – B.burgdorferi, на евро-азиатском континенте –
B.garini и B.afzelii.
Источники инфекции: мелкие млекопитающие.
Путь заражения: трансмиссивный (при укусе переносчика – иксодового кле-
ща).
Патогенез заболевания связан с распространением возбудителя из места укуса с током крови в различные органы, чаще сердце, ЦНС и суставы.
Клинические проявления: на месте укуса появляется мигрирующая кольцевидная эритема в виде овальной или круглой папулы. Если больные остаются без лечения, то микроорганизм гематогенным путем распространяется в организме, вызывая артриты, миокардит, менингит.
Микробиологическая диагностика.
1.Микроскопический метод: из биоптатов кожи, ликвора и синовиальной жидкости готовят мазки в окраске по Романовскому-Гимзе.
2.Серологический метод: определение IgM и IgG в сыворотке крови больного с помощью реакции непрямой иммунофлюоресценции, ИФА.
3.ПЦР.
Специфическая профилактика и специфическое лечение не разработаны.
Возбудитель эпидемического возвратного тифа – B.recurrentis.
Источник инфекции: больной человек.
Путь заражения: трансмиссивный.
Переносчики: головные и платяные вши. Заражение происходит в результате втирания в кожу гемолимфы раздавленных вшей при расчесывании места укуса.
Патогенез: попавшие в организм боррелии поглощаются фагоцитами, размножаются в них и попадают в кровь. Затем они разрушаются и выделяют эндотоксин, что вызывает лихорадку, сосудистые расстройства, головные боли. Под действием антител большинство возбудителей погибает. Однако, часть боррелий сохраняется в паренхиматозных органах, размножается и образует новую антигенную разновидность возбудителя, которая вновь поступает в кровь. Возникает рецидив. В течение заболевания формируется иммунитет против нескольких антигенных разновидностей возбудителя и наступает выздоровление.
5