40. Каков механизм развития иммунодефицита человека в результате заражения его возбудителем?

1)Проникнув в организм, вирус атакует клетки, содержащие рецептор CD4(находится на Т-х,МФ,МЦ).

2)Проникновение вируса в клетку (в ядро), синтез сначала минус- цепи ДНК, а потом плюс-цепи ДНК с помощью обратной транскриптазы. В клетке вирус находится в неактивном состоянии до тех пор, пока данный Тл не будет активирован микробными АГ или другими иммунокомпетентными клетками.

С момента проникновения вируса в клетку начинается период ВИЧ-инфекции – вирусоносительства( 10 и более лет) а с момента активации вируса начинается болезнь – СПИД.

3) С помощью своих регуляторных генов вирус начинает активно размножаться, происходит уменьшение количества CD4+-клеток за счет апоптоза, образования синцитиев (симпластов), аутоиммунных реакций и инфицирования клеток-предшественников. Следствием этого уменьшения клеток является глубокий вторичный иммунодефицит, проявляющийся резким снижением сопротивляемости организма оппортунистическим микроорганизмам и развитию опухолей (саркома Капоши, карциномы кожи).

ВИЧ длительно сохраняется в макрофагах и с их помощью диссеминирует по всему организму, в том числе заносится в ЦНС. Вирус инфицирует астроциты, вызывает образование симпластов и последующую гибель клеток.

41. Какие клетки организма поражает вирус иммунодефицита и какой рецептор имеют эти клетки?

Проникнув в организм, вирус в первую очередь атакует клетки, содержащие рецептор CD4. Этот рецептор имеют в большом количестве Т-хелперы, меньше-макрофаги и моноциты. Вирус распознаёт СD4 рецепторы с помощью своего белка gp120.

42.Какая иммунологическая реакция применяется для обнаружения поверхностного антигена(hBsAg) вируса гепатита в у больных и вирусоносителей?

Реакция обратной пассивной гемагглютинации (РОПГА).В крови поверхностного антигена содержится во много раз больше, чем самого вируса. Для реакции РОПГА используют сенсибилизированные АТ против вируса гепатита B эритроциты .При наличии АГ в крови происходит реакция гемагглютинации.

43. Каково значение гемагглютининов вирусов гриппа?

Гемагглютинин содержится в суперкапсиде (мембране) вириона и выступает на мембране в виде различных шипов.

Основные функции гемагглютинина:

1)распознает клеточный рецептор – мукопептид, имеющий N-ацетилнейраминовую (сиаловою) кислоту.

2)Обеспечивает слияние мембраны вириона с мембраной клетки и мембранами ее лизосом, т. е. отвечает за проникновение вириона в клетку.

3)определяет пандемичность вируса( смена гемагглютинина причина пандемий, его изменчивость эпидемий гриппа)

4)обладает наибольшими протективными свойствами, отвечая за формирование иммунитета.

У вирусов гриппа А обнаружено 13 различающихся по антигену типов гемагглютинина, которым присвоена нумерация(Н1-Н13).

44. Как устроены аденовирусы, чем представлен их геном, какие заболевания вызывают аденовирусы?

Аденовирусы лишены суперкапсида. Вирион имеет форму икосаэдра – кубический тип симметрии, диаметр 70-90 нм. Геном представлен линейной молекулой двухнитевой ДНК. ДНК, связываясь с белками, формирует плотную сердцевину вируса, видимую при электронной микроскопии. Дезоксирибонуклеопротеид представляет собой структуру из 12 петель, вершины которых направлены к основаниям вершинных капсидов. Капсид состоит из 252 капсомеров, 240 из них (гексоны) образуют его грани, 12 (пентоны) – полигональные основания и прикрепленные к нему нити. Гексоны определяют токсическую активность, пентоны и нити – гемагглютинирующие свойства. Транскрипция и репликация происходят в ядре, трансляция – в цитоплазме. Вызывают респираторный, конъюктивальный и кишечный синдромы.

37.По каким признакам можно судить о размножении вирусов в культуре клеток?

О размножении вирусов в культуре ткани можно судить по цитопатическому действию (ЦПД):

•деструкции клеток,

•изменению их морфологии,

•формированию многоядерных симпластов или синтиция в результате слияния клеток.

•в клетках культуры ткани при размножении вирусов могут образовываться включения - структуры, не свойственные нормальным клеткам.

Включения выявляются в окрашенных по Романовскому-Гимза мазках из зараженных клеток. Они бывают эозинофильные и базофильные.

По локализации в клетке различают:

•цитоплазматические,

•ядерные,

•смешанные включения.

Характерные ядерные включения формируются в клетках, зараженных вирусами герпеса (тельца Каудри), цитомегалии и полиомы, аденовирусами, а цитоплазматические включения - вирусами оспы (тельца Гварниери и Пашена), бешенства (тельца Бабеша-Негри) и другие.

38. Какие методы применяются для диагностики вирусного гепатита а?

Для диагностики, кроме заражения животных, предложены различные иммунологические методы: РСК, иммунофлуоресцентный метод, гемагглютинация иммунного прилипания. Однако применение этих методов ограничены из-за отсутствия специфический вирусных антигенов. Поэтому сейчас приемлем метод иммунносорбентного анализа твердой фазы в виде ИФМ или РИМ, особенно в модификации захвата иммуноглобулинов класса М. Принцип работы «ДИАГН-А-ГЕП»: на стенках полистероловых луночек сорбируются вначале антитела к иммуноглобулинам класса М, затем добавляется исследуемая сыворотка больного. Если в ней есть антитела класса IG M, они будут связываться анти-антителами М, затем добавляются специфический вирусный антиген, Система промывается, и к ней добавляются противовирусные антитела, меченные пероксидазой хрена. Если произойдетвзаимодействие всех 4 компонентов системы, возникает 4-хслойный «сендвич»:антииммуноглобулины М, иммуноглобулины М, вирусный антиген, антивирусныеантитела, меченные ферментом. Для обнаружения этого комплекса в луночки добавляют субстрат для фермента (под влиянием фермента он разрушается и образуется окрашенный продукт).

Также предложен метод ДНК-зонда: используют в качестве зонда ДНК комплементарную вРНК.

39. Как проникает в организм вирус гриппа, и из каких основных этапов складывается процесс его внутриклеточного размножения?

Вирус поступает в организм от человека и очень редко от животного, воздушно-капельным путем.

Адсорбция вируса на мембране клетки происходит благодаря взаимодействию его гемагглютинина с мукопептидом. Затем вирус проникает в клетку с помощью одного из 2 механизмов:

1. Слияние мембраны вириона с мембраной клетки

2. По пути окаймленная ямка – окаймленный пузырек – эндосома – лизосома – слияние мембраны вириона с мембраной лизосомы – выход нуклеокапсида в цитозоль клетки.

Второй этап «раздевания» вириона (разрушение матриксного белка) происходит на пути к ядру. Для транскрипции вирусу необходима затравка, т.к он сам не может синтезировать кэп (участок необходимый для распознавания мРНК рибосомой). Поэтому он с помощью своего белка РВ2 откусывает кэп от клеточной мРНК и проникает в ядро, полностью подчиняя себе клетку.

В ядре на вРНК синтезируются три типа вирусоспецифических РНК

1. Позитивные комплементарные РНК(мРНК), используемые в качестве матриц для синтеза вирусных белков

2. Полноразмерная комплементарная РНК(кРНК) – матрица для вирионных РНК

3. Негативная вирионная РНК(вРНК) – геном для вновь синтезируемых вирионов.

Немедленно, ещё до завершения синтеза, вРНК и кРНК вступают в ассоциацию с капсидными белками, которые поступают в ядро из цитозоля. В состав вирионов включаются только рибонуклеопротеиды, связанные с вРНК. Вновь синтезируемые молекулы вРНК после ассоциации с капсидными белками мигрируют из ядра в цитозоль.

35. .Какие типы антигенной изменчивости вируса гриппа в клетке Вы знаете ,каково их значение в эпидемиологии этой болезни?

Иммунитет-основной регулятор эпидемий гриппа. По мере нарастания коллективного иммунитета эпидемия идет на убыль. Вместе с тем вследствие формирования иммунитета происходит отбор штаммов вируса с измененной антигенной структурой, прежде всего гемаглютинина и нейрамидазы. Эти вирусы продолжают вызывать вспышки до тех пор, пока и к ним не появятся антитела. Такой антигенный дрейф и поддерживает непрерывность эпидемии. Однако у вируса А обнаружена еще одна форма изменчивости-шрифта или сдвига. Она связана с полной сменой одного типа гемагглютинина на другой.

У вируса А есть два пути изменения генома:

1)точечные мутации, обуславливающие антигенный дрейф. Ими подтвержены прежде всего,гены гемагглютинина и нейрмамидазы, особенно у вируса H3N2.вызвал 8 пандемий с 1982 по 1998 и сохраняет эпидемическое значение до сих пор.

2) реассоцияция генов между вирусами группа человека и вирусами гриппа птиц и свиней.-антигенный дрейф выражен слабее ,чем у А. Вирусы гриппа В являются виновниками локальных вспышек и эпидемий, пандемий не вызывает. Вирус С ему не свойственна такая изменчивость как у вирусов типа А и В.

36. Как осуществляется специфическая профилактика бешенства и какие препараты применяются для этой цел и в каких случаях?

Профилактика заключается в борьбе с бешенсвтом среди животных и предупреждения развития болезни у людей ,подвергшимся укусам и ли ослюнению больным животным.Программу ликвидации бешенства наземных животных необходимо рассматривать в двух аспектах.1-искоренение городского собачьего бешенства,2-оздоровление природных очагов рабической инфекции .Возможен контроль за эпизоотиями городского типа путем регистрации и иммунизации собак..За рубежом скармливают диким животным приманок,которые содержат вакцину..Также используются оральные антирабические вакцины-живая модифицированная цельновирионная вакцина из аттенуированных вакцинных штаммов и рекомбинатная генно-инженерная оральная вакцина с использованием в качетстве вектора вируса осповакцины ,экспрессирующего ген G-протеина вируса бешенства.Первоначально раны или укусы промывают мыльной водой ,рану прижигают спиртовым раствором йода и начинают проводить специфическую иммунопрофилактику антирабической вакциной и антирабическим гамма -глобулином. Вместо использования раннее весьма реактогенной вакцины Ферми (из мозговой ткани овец.,зараженных фиксированным вирусом)сейчас для профилактики бешенства рекомендована антирабическая инактивированная вакцина ,которая изготовлена на культуре клеток,инфицированных аттенуированным вирусом бешенства .Экстренная лечебно-профилактическая вакцинация проводится вакциной или вакциной в сочетании с антирабическим гамма-глобулином по схемам,указ.в наставлениях к их применению.Схема какцинации определяется степенью тяжести укуса ,его локализацией,временем,прошедшим после укуса,информацией об укусившем животном и др. обстоятельствами.

30. Как устроен вирус иммунодефицита человека?

Вирус ВИЧ имеет шаровидную форму, его диаметр 110 нм. Оболочка вируса имеет форму многогранника ,составленного из 12 пятиугольников и 20 шестиугольников. В центре и углах каждого шестиугольника расположены молекулы gp120(всего 80 молекул на вирион), оболочка содержит двойной слой липидов , над которым выступают молекулы gp120 ,а через мембрану проходит трансмембранный белок gp41. Эти белки вместе с двойным липидным слоем образуют суперкапсид вириона.В центральной части вириона белок р24 образует конусообразный капсид,внутри капсида заключены две идентичные молекулы вирусной геномной рнк они 5” концами с нукеокапсидным белком р7NC в состав капсида входят также 3 фермента: Ревертаза или pol-комплекс включает в себя обратную транскрптазу, РНКазу Н и ДНКзависимую ДНКполимеразу. Протеазу р10 запускает и реализует процесс созревания вириона. Интеграза р31 или эндонуклеаза обеспечивает включение провирусной ДНК в геном клетки хозяина. В капсиде также содержитьсямолекула затравочной РНК. РНК геном клетки с помощью обратной транскриптазы превращается в ДНК геном( ДНК провирус) геном вич состоит 9 генов часть из которых перекрываетсяси имеет экзон интронную структ. Они контролируют синтез 9 структурных и 6 регуляторных белков.

31. Что такое иммуноблотинг и для какой цели он применяется?

Иммуноблотинг – в основе этого метода лежит идентификация исследуемых АТ после электрофоретического разделения их и последующего тестирования с помощью меченных антивидовых АТ. Тест применяют для подтверждения факта ВИЧ-инфекции. Метод позволяет обнаружить специфические АТ в сыворотке и является только подтверждающим тестом.

32. Из каких основных этапов складывается процесс взаимодействие вич с клеткой?

Проникнув в организм, вирус в первую очередь атакует клетки, содержащие рецептор CD4. Этот рецептор имеют в большом количестве Т-хелперы, меньше-макрофаги и моноциты.

Процесс взаимодействия: рецторопосредованная адсорбция – окаймлённая ямка – окаймлённый пузырёк – лизосома. В ней мембрана вибриона сливается с мембраной лизосомы и нуклеокапсид, освобождённый от суперкапсида, выходит в цитоплазму; на пути к ядру он разрушается и высвобождается геномная РНК и ассоциированные с ней компоненты. На РНК синтезируется минус-цепь ДНК , и вирусная ДНК цепь синтезирует плюс-цепь ДНК, которая встраивается в хромосому клетки-мишени. Провирус находится в неактивном состоянии до тех пор, пока данный т-лимфоцит не будет активирован микробными антигенами.

33.Какие вирусы являются возбудителями острых респираторных заболеваний (орз)?

Возбудителями ОРЗ являются:

1)Orthomyxoviridae(Вирусы гриппа А,В,С)РНК

2)Paramyxoviridae(вирусы парагриппа человека,птиц,вирус кори,респираторно-синцитиальный вирус)РНК

3)Coronaviridae(респираторные короновирусы)РНК

4)Reoviridae(респираторные реовирусы)РНК

5)Picornaviridae(риновирусы,сероварианты вируса Коксаки иECHO)РНК

6)Adenoviridae(респираторные вирусы)ДНК

34. Почему лица, пораженные вирусом иммунодефицита, становятся легко восприимчивыми к различным, даже слабо патогенным микроорганизмам, иначе говоря, почему у них часто развиваются оппортунистические инфекции?

В результате размножения вируса ВИЧ-инфекции происходит уменьшение количества CD4⁺-клеток за счет апоптоза, образования синцитиев (симпластов), аутоиммунных реакций и инфицирования клеток-предшественников. Следствием этого уменьшения клеток является глубокий вторичный иммунодефицит, проявляющийся резким снижением сопротивляемости организма оппортунистическим микроорганизмам и развитию опухолей (саркома Капоши, карциномы кожи).

26. Как устроен вирус полиомиелита и каковы способы заражения этим возбудителем?( бабичев, 348)

Геном вируса полиомиелита представлен однонитевой нефрагментированной РНК, состоящей из 7,5-8 тыс. нуклеотидов, ее молекулярная масса составляет 2,5 МД.

Масса вириона составляет 8-9 МД. Вирус имеет сферическую форму. Тип симметрии – кубический. Капсид вириона образован 4мя белками по 60 копий каждого. Три из них образуют внешнюю поверхность капсида , а 4й внутреннюю. Оболочка вириона формируется из 12 компактных структур, называемых пентамерами ( вершина – VP1, основание – VP4, белки VP2 и VP3 вперемежку окружают подножие).

Источником инфекции является только человек. Основной способ зарожения – фекально –оральный, также выделяют контактно-бытовой и воздушно-капельный пути .

27. С помощью какой серологической реакции можно определить наличие вируса иммунодефицита в организме человека и в чем сущность этой реакции?

Основным способом диагностики вирусоносительства и ВИЧ-инфекции является иммунноферментый метод (ИФМ). Для этой цели существуют различные тест-системы, с помощью которых обнаруживаются АТ к ВИЧ. Суть реакции заключается в том , что:

- на первом этапе происходит адсорбция специфических АГ на стенке луночки

- на втором этапе в луночки добавляют сыворотку, если в ней имеются АТ к

- на третьем этапе после отмывания луночек в них добавляют специфические антиглобулиновые АТ меченные ферментом.

Однако в связи с тем, что gp120 имеет структурное и антигенное сходство с рецепторами некоторых клеток человека, в том числе с рецепторами, которое осуществляют транспорт иммуноглобулинов через эпителиальные клетки слизистых оболочек, в организме могут появляться АТ, родственные АТ против gp120. В этом случае могут быть ложнопозитивные результаты ИФМ, поэтому все положительные результаты перепроверяются методом иммуноблотинга. М етод ПЦР позволяет выявить вирус уже на раннем этапе вирусемиии

28. Каков механизм торможения гемагглютинации?

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) может быть использована для определения типа вируса или типа и титра антител.Для определения типа вируса на предметное стекло наносят по одной капле вирусосодержащего материала(количество капель должно соответствовать количеству сывороток).В приготовленные капли последовательно вносят по одной калпе типовых сывороток. Контролем служит физиологический контроль и нормальная сыворотка. Затем в каждую каплю вносят по одной капле 5 % взвеси эритроцитов. Результат регистрируют через 5 минут. При соответствии вируса типу сыворотки антитела связывают гемагглютинин вируса и гемагглютинация не наступает (РТГА положительная).Эта реакция может быть поставлена и в пробирках с целью титрования вируса или антител(антигемаглютининов).

29. Какие существуют методы культивирования вирусов? Как типируют вирусы?

Методы культивирования вирусов: 1) заражение лабораторных животных, 2) заражение куриных эмбрионов, 3) заражение культур тканей.

Определение типа вирусов в вирусосодержащем материале основано на нейтрализации вируса типоспецифическими сыворотками. Конечный результат реакции может быть установлен на основании след. признаков: нейтрализация цитопатического действия, нейтрализация реакции гемадсорбции, цветная проба, задержка гемагглютинации, свечение клеток, содержащих вирус, под влиянием специфических флуоресцируюцих сывороток, нейтрализации в опыте на животных, ДНК-(РНК-)- гибридизация, полимеразная цепная реакция.