1) адсорбция вируса на клетке;
2) проникновение вируса в клетку;
3) «раздевание» вируса;
4) биосинтез вирусных компонентов в клетке;
5) формирование вирусов; выход вирусов из клетки.
Особенности ретровирусов:
1.Геном представлен однонитевой нефрагментированной позитивной РНК, в виде двух идентичных молекул, диплоидный.
2. В составе вириона обратная транскриптаза, т. е. РНК-зависимая ДНК-полимераза, или ревертаза. По этому признаку семейство получило название (англ. retro - обратно, назад). Этот фермент, называемый полимеразным комплексом, состоит из нескольких доменов и обладает 3 видами активности: обратной транскриптазы, РНКазы Н и ДНК-зависимой ДНК-полимеразы.
3.Благодаря наличию обратной транскриптазы РНК-геном вируса в клетке превращается в ДНК-геном и в таком виде интегрируется в хромосому клетки-хозяина, в результате чего она либо погибает (ВИЧ), либо превращается в опухолевую (онковирусы).
4.В связи с тем что функция обратной транскриптазы не контролируется, фермент допускает много ошибок. Это влечет за собой высокую частоту мутаций в генах, кодирующих структурные белки вируса, т. е. его постоянную изменчивость, что создает трудности в создании эффективных вакцин.
5.По структуре нуклеокапсида и расположению его в вирионе - 5 форм ретровирусов: А, В, С, D, Е.
А - шарообразный нуклеокапсид занимает большую часть вириона.
В - округлой формы расположен эксцентрично.
С - шарообразный расположен в центре вириона.
D - цилиндрической формы (типа снаряда) с центральным расположением в вирионе.
Е - по морфологическим признакам близки к вирусам типа С, но по ряду других свойстз отличаются от них.
6.Все ретровирусы имеют общие структурные гены: gag, pol, env, но антигенные связи между родами вирусов или отсутствуют, или крайне слабые.
Семейство Retroviridae включает три подсемейства.
Spumavirinae - «пенящие» вирусы; такое название дано потому, что при раз множении в культуре клеток происходит интенсивное симпластообразование, которое придает культуре «вспененный» вид. Связи этих вирусов с какими-либо патологическими процессами не установлено.
Oncovirinae - онкогенные вирусы, т. е. вирусы, ответственные за превращение нормальной клетки в опухолевую.
Lentivirinae - вирусы - возбудители медленных инфекций. К этому подсемейству относится вирус, вызывающий СПИД.
63.Что такое лизогения и лизогенная конверсия? Какими фагами вызывается-вирулентными или умеренными?Лизогения, т.е. внедрение профага в хромосому клетки-хозяина, в результате чего она получает новые наследуемые признаки .Такую форму ее изменчивости называют лизогенная конверсия, т.е. изменчивость обусловленная лизогенией(вызывают только умеренные фаги).
По рекомендации ВОЗ, прививки против полиомиелита являются обязательными и проводятся начиная с 3-месячного возраста и до 16 лет. Применяют «Живая пероральная вакцина А. Себина»
«Убитая(инактивированная) парентеральная вакцина Солка»
Гепатит В - инфекционное заболевание человека, характеризующееся избирательным поражением печени вирусом. ( эта форма гепатита наиболее опасна).
Вирион - имеет три основных антигена.
HBsAg – поверхностный или растворимый или австралийский антиген.
HBcAg - сердцевинный антиген (сог-антиген).
HBeAg - антиген е, локализован в сердцевине, циркулирует в крови в свободном виде или в виде комплекса с антителом анти-HBeAg
Вирион - частица Дейна - имеет сферическую форму и диаметр 42 нм.
Суперкапсид вириона состоит из трех белков: главного (основного), большого и среднего.
Геном заключен в капсид и представлен двунитевой кольцевидной ДНК. В сердцевине вириона находится кроме геномной ДНК-вирусная ДНК-зависимая ДНК-полимераза. ДНК HBV содержит четыре гена S, С, Р и X
Ген S кодирует синтез главного белка оболочки и содержит всю информацию о поверхностном антигене HBsAg. он кодирует синтез среднего и большого белков оболочки.
Ген С кодирует синтез капсидных белков (HBcAg и HBeAg); хотя эти белки кодируются одним геном, пути их трансляции различны.
Ген Р - самый большой. Он включает в себя часть всех трех других генов и кодирует ферменты, необходимые для репликации вируса. Он кодирует обратную транскриптазу, домен фермента РНК-азы Н
Ген X кодирует белки, регулирующие экспрессию (выражение) всех вирусных генов, в частности белок, являющийся трансактиватором транскрипции генов.
Особенности репродукции связаны с функциями фермента обратной транскриптазы (ревертазы или РНК — зависимой ДНК — полимеразы), обладающей тремя видами активности — обратной транскриптазы, РНК — азы и ДНК — полимеразы. Обратная транскриптаза синтезирует на вирионной РНК минус — цепь ДНК, РНК-аза разрушает вирионную РНК, а вирусная ДНК — полимераза синтезирует на минус — цепи плюс — цепь ДНК.
Дизентерийный бактериофаг приводит к специфическому лизису микроорганизмов, которые вызывают бактериальную дизентерию.
«Гриппол»-высокоэффективная и безопасная полимер-субъединичная вакцина последнего поколения против гриппа. Предназначен для профилактической иммунизации(вакцинации) против гриппа.
Гриппозная полимер-субъединица «Гриппол» представляет собой стерильный раствор протективных поверхностных АГ гемагглютинина и нейраминидазы, выделенных из вирусов гриппа А и В, в комплексе с водорастворимым высокомолекулярным иммуностимулятором полиоксидоний. Вакцина формирует специфический иммунитет,антитела появляются на 8-12 день,иммунитет сохраняется до 12мес.,в том числе и у пожилых людей.
Полиоксидоний обеспечивает высокую иммуногенность и стабильность АТ, существенно позволяет снизить прививочную дозу по гемагглютинину-белку вируса гриппа. В вакцине «Гриппол» содержится в 3 раза меньше гриппозных АГ, чем в других вакцинах. Вакцина так же повышает общую сопротивляемость к другим респераторно-вирусным инфекциям,уменьшая риск простудных заболеваний.
1) Одноцепочечная нефрагментированная РНК, обладающая матричной активностью (позитивная, или +РНК)
2) Одноцепочечная нефрагментированная РНК, не обладающая матричной активностью (негативная, или –РНК). Вирион имеет в своем составе фермент РНК-зависимую РНК-полимеразу, называемую транскриптазой. Она синтезирует на вирионной РНК матричную РНК, необходимую для трансляции вирусспецифических белков. Парамиксовирусы, рабдовирусы и др.
3) Одноцепочечная фрагментированная РНК, не обладающая матричной активностью (негативная РНК); вирион имеет транскриптазу. Ортомиксовирусы (РНК вириона состоит из 8 фрагментов).
Могут быть использованы для обнаружения в исследуемом материале как специфических антител, так и вирусных антигенов. Следующие реакции:
1)Реакция связывания комплемента.
2)Реакция пассивной гемагглютинации и ее варианты.
3)Реакция торможения гемагглютинации.
4)Реакция гемагглютинации иммунного прилипания (комплекс аг+ат в присутствии комплемента адсорбируется на эритроцитах).
5)Реакция преципитации в геле.
6)Реакция нейтрализации вирусов.
7)Радиоиммунный метод.
8)Методы иммуноферментного анализа (! Популярен, высокая специфичность и удобство использования)
(открыл Фейнстон в 1973)
Вирусный гепатит А - инфекционная болезнь человека, характеризующаяся преимущественным поражением печени и проявляющаяся клинически интоксикацией и желтухой. Вирус гепатита А имеет сферическую форму, диаметр вириона - 27 нм. Геном представлен однонитевой позитивной РНК. Суперкапсид отсутствует. Тип симметрии кубический - икосаэдр. Капсид имеет 32 капсомера, он образован четырьмя полипептидами (VP1-VP4). По своим свойствам вирус гепатита А отнеси к роду Heparnovirus, семейству Picornaviridae. В антигенном отношении вирус гепатита A (HAV - hepatitis A virus) является однородным.
Проникнув в организм, вирус в первую очередь атакует клетки , содержащие специфический для него рецептор СD4. Этот рецептор имеют в большом количестве Т-хелперы, в меньшем –макрофаги и моноциты. Вирус распознает рецептор с помощью своего белка gp120.
Для вакцинопрофилактики созданы 2 вакцины: 1) инактивированная формалином вакцина Дж. Солка, 2) живая вакцина А. Себина из аттенуированных им штаммов полиовирусов 1,2,3 типов. По рекомендации ВОЗ, прививки против полиомиелита являются обязательными и проводятся начиная с 3-месячного возраста и до 16 лет. Т.к. живая вакцина, хотя и крайне редко, вызывают осложнения, прививки теперь рекомендуется проводить инактивированной вакциной Солка.
1)Вирус полиомиелита
2)Вирус Коксаки
3)Вирусы ЕСНО
4)Ротавирусы
5)Вирусы Норволк
6)Кальцивирусы
7)Астровирусы
Серологическая диагностика гриппа базируется на выявлении возрастания титра противогриппозных антител в динамике заболевания или на определении специфических иммуноглобулинов класса М.
Для данного вида диагностики гриппа чаще применяют РТГА. Последнюю выполняют микрометодом с использованием микропланшетов для иммунологических исследований (общий объем реакции -100 мкл).
В процессе серологического исследования сывороток крови в РТГА используют их последовательные (начиная с 1:10) двукратные разведения на изотоническом растворе натрия хлорида, диагностикумы вирусов гриппа А(Н1N1), A(H3N2) и В в рабочем разведении 4 ГАЕ в 25 мкл, а также взвесь эритроцитов петуха или человека с группой крови 0 в концентрации 0,4-0,5% (соотношение объемов перечисленных компонентов РТГА 1:1:2).
Перед исследованием сыворотки крови обрабатывают с целью освобождения их от неспецифических ингибиторов гемагглютинации вирусов гриппа. Для этого чаще используют универсальный препарат - рецепторразрушающий энзим (РРЭ), подходящий для устранения неспецифической ингибиции гемагглютинации вирусов гриппа всех типов. РРЗ представляет собой фермент нейраминидазу, получаемую из нехолерных вибрионов.
Для серодиагностики гриппа можно исследовать и одну только сыворотку крови больного на наличие противогриппозных иммуноглобулинов класса М, которые свидетельствуют об острой инфекции. При отдельном определении антител класса М сыворотку крови больного предварительно разделяют на 2 порции, одну из которых сохраняют до постановки определенной серологической реакции, а другую обрабатывают для разрушения макроглобулинов класса М физическими или химическими методами. Один из них - прогревание порции сыворотки при 60 °С на протяжении 30 мин, второй - обработка порции сыворотки 2-меркаптоэтанолом. После этого обе порции исследуют, например, в РТГА. Снижение титров противогриппозного антигемагглютинина в 4 и более раз в порции сыворотки, в которой предварительно разрушали иммуноглобулин, свидетельствует об их наличии в исследуемой сыворотке, что лабораторно подтверждает диагноз гриппа.
Существует методика выборочного удаления из одной порции исследуемой сыворотки противогриппозных lg с помощью белка А золотистого стафилококка (штамма Cowan). При последующем серологическом исследовании обеих порций сыворотки выявление сниженного или неизмененного титра специфических
Форма сферическая. Геном-одноцепочная кольцевая РНК. Вирион имеет два белка, внутренний(кодируется геном НDV) и наружний(это поверхностный антиген вируса гепатита В). Полагают что HDV это сателлит вируса гепатита В, и для размножения HDV требуется наличие вируса хозяина(HDV). 3 генома HDV. Заражение происходит парентерально(с кровью и ее препаратами)или от матери к плоду.
Источником заражения является только человек. Он обнаруживается в различных секретах и экскретах: слюне, носоглоточных выделениях, испражнениях, слезной жидкости, сперме, менструальной крови. Заражение происходит парентеральным путем, половым и вертикальным.
Сущность метода заключается в обнаружении специфических антител или антигенов с помощью меченных ферментом антител или меченных ферментом антиглобулиновых антител.
Реакция ставится в 3 этапа.
Для обнаружения АГ:
1 этап – адсорбция специфических антител твердой фазой.
2 этап – связывание антигена из исследуемого материала с антителом за счет реакции антиген-антитело, на границе твердая фаза-жидкость.
3 этап – обработка твердой фазы специфическими мечеными ферментом антителами.
Таким образом в случае присутствия в материале искомого антигена образуются комплексы – антитело-антиген-меченное антитело.
Для обнаружения АТ:
1 этап – адсорбция специфических антигенов на стенках луночки.
2 этап – связывание добавление в луночки образцов исследуемой сыворотки, образование комплекса антиген-антитело.
3 этап – после отмывания луночек добавляют специфические антиглобулиновые тела, но меченные ферментом.
Для вакцинации предложено 2 типа вакцин .Для приготовления одной из них используют плазму вирусоносителей. Для приготовления другого типа применяют методы генной инженерии ,в частности, для получения антигенного материала используют рекомбинантный клон дрожжей ,вырабатывающих поверхностный АГ вируса гепатита В.
Обе вакцины обладают высокой эффективностью.(защищают 95 % привитых).Продолжительность поствакцинального иммунитета 5-6 лет. В России , помимо взрослых и детей ,вакцинируют и новорождённых. Полный курс состоит из 3 инъекций .I доза-сразу после рождения;II доза-через 1-2 месяца ;III доза-до конца первого года жизни.
Вакцинация взрослых: первые две прививки - с интервалом 1 месяц, третья - через 6 месяца после второй. Иммунизируются дети и взрослые из групп риска (медицинские работники, лица получающие препараты крови и пр.)
Гамма-глобулин, содержащий антитела против HBV ,применяют для экстренной пассивной иммунопрофилактики лицам, имевшим контакт с больным гепатитом В.
Интерфероны – видоспецифические беки, обладающие широким спектром биологического действия. Он первый реагирует на проникновение вируса в организм и подавляет его внутриклеточное размножение. Противовирусный эффект заключается в подавлении синтеза вРНК, синтеза оболочки вируса. Механизм действия заклячается в активации внутриклеточных ферментов: протеинкиназа- разрушает фактор инициации синтеза белка с мРНК, что подавляет синтез белковой молекулы и аденилатсинтетаза – вызывает синтез веществ, разрушающих вРНК.
Репликация происходит через образование вначале репликативной формы, а затем промежуточной репликативной формы. Репликативная форма возникает в результате синтеза на исходной вирионной ДНК (+ нити) комплементарной ей - нити, т.е однонитевая ДНК превращается в двунитевую ДНК. Промежуточная репликативная форма – это репликативная форма, -нить которой служит матрицей для синтеза +нити ДНК, идентичной исходной вирионной ДНК.