Материал: Биоиндикация. Микробиологические методы исследования экосистем (90

2 (n n)2 , x 1

где n − число колоний, выросших на первой, второй и т. д. чашках, засеянных из одного разведения; n − среднее их значение; x − число чашек Петри одного разведения, используемых в опыте.

Аналогично проводят подсчет численности олиготрофов

NРПА 1:10.

Для подсчета числа олиготрофов в 1 мл воды используют значения n , полученные при посеве на среду РПА 1:10, результат также выражают в колониеобразующих единицах (КОЕ/мл).

1.1.5. Морфологическое описание колоний

На поверхности питательной среды микроорганизмы могут расти в виде колоний, штриха или сплошного газона. Колонией называют изолированное скопление клеток одного вида, выросшее, в большинстве случаев, из одной клетки.

Колонии, выросшие на поверхности питательной среды, отличаются большим разнообразием. Словесное их описание проводят по следующей схеме:

1) форма – округлая, неправильная, ризоидная и т. д. (рис. 2); 2) диаметр – в мм. Если размеры колонии не превышают

1 мм, то их называют точечными;

3)поверхность – гладкая, шероховатая, бороздчатая, складчатая, морщинистая с концентрическими кругами;

4)профиль – плоский, выпуклый, кратерообразный, конусовидный и т. д. (рис. 3);

5)блеск и прозрачность – блестящая, матовая, тусклая, мучнистая, прозрачная;

6)цвет – бесцветная (грязно-белые колонии относят к бесцветным) или пигментированная – белая, желтая, золотистая, оранжевая, сиреневая, красная, черная. Особо отмечают выделение пигмента в субстрат;

7)край колонии – ровный (гладкий), волнистый, зубчатый, бахромчатый (лопастной, неправильный, реснитчатый, ворсинчатый), ветвистый и т. д. (рис. 4);

8)консистенция – плотная, мягкая, врастающая в агар, слизистая (прилипает к петле), тягучая, пленчатая (снимается цели-

11

ком), хрупкая (легко ломается при прикосновении петлей). Консистенцию колонии определяют, прикасаясь к ее поверхности петлей.

Рис. 2. Форма колоний: 1 – круглая; 2 – круглая с фестончатым краем; 3 – круглая с валиком по краю; 4, 5 – ризоидные; 6 – с ризоидным краем; 7 – амебовидная; 8 – нитевидная; 9 – складчатая; 10 – неправильная; 11 – концентрическая; 12 – сложная

12

палочки; 3) грамположительные неспорообразующие палочки; 4) грамположительные спорообразующие палочки.

При интерпретации результатов можно ориентироваться на следующие показатели:

-в относительно чистых водах преобладают кокки (до 80% от общего количества гетеротрофных бактерий);

-при загрязнении возрастает доля спорообразующих и других палочковидных форм (до 80%), появляются в значительном количестве вибрионы (10% и более), удельный вес кокков резко падает (10% и менее);

-преобладание неспорообразующих палочковидных форм

над спорообразующими говорит об усиленных процессах эвтрофикации5 [5].

1.1.7. Определение индекса трофности

Как уже было сказано, автохтонные микроорганизмы природных вод адаптированы к невысокому содержанию органического вещества и выделяются из воды преимущественно на средах с низкой его концентрацией. Поэтому изменение величины соотношения численности бактерий, растущих на обедненных

5 Эвтрофикация (евтрофикация) – повышение интенсивности продуцирования органического вещества вследствие увеличения содержания в водоемах азота, фосфора и других биогенных элементов.

14

средах и стандартном МПА или РПА, может служить индикатором изменения трофического состояния водоема. Величину этого соотношения используют в качестве индекса трофности (ИТ):

ИТ = NРПА:10 / NРПА ,

где NРПА – численность копиотрофных бактерий, выросших на РПА; NРПА:10 – численностьолиготрофныхбактерий, выросшихнаРПА:10.

Используя полученные значения по численности копиотрофных и олиготрофных бактерий, рассчитывают ИТ для исследуемого участка водоема.

При оценке состояния водоема принимают во внимание, что в относительно бедных органическим веществом водах (мезотрофные и олиготрофные) наиболее благоприятные условия складываются для олиготрофных бактерий, поэтому ИТ может достигать значений от 10 до нескольких сотен. В загрязненных и высокотрофных водах преобладают бактерии, использующие высокие концентрации органического вещества, в связи с чем ИТ в таких водоемах составляет 2–3 и даже может снижаться до 1 [6].

1.1.8. Обобщение полученных результатов

Результаты, полученные всеми рабочими звеньями, заносят в итоговую таблицу (табл. 3).

Таблица 3

Итоговая таблица по обследованному объекту

Пользуясь справочным материалом (прил. 6), определяют класс качества воды, категорию трофности и зону сапробности6

6 Сапробность (от греч. sapros – гнилой) – степень загрязнения водоема. Трофность – характеристика водоёма по его биологической продуктивности, обусловленной содержанием биогенных элементов.

15