Материал: Маркелова Е.В. Персистирующие вирусные инфекции. этиология и иммунопатогенез

печени в баллах выявлена высокая степень корреляции между параметрами ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-12р70 и ФНО-α, что дает возможность использования их в качестве достоверных маркеров выраженности фиброза печени (табл. 29).

Таблица 29

Коэффициенты корреляции (R) и уровни их значимости (р) между выраженностью фиброза (F) и показателями содержания сывороточных и локальных цитокинов при ХВГС

Наиболее значимым для оценки выраженности фиброза явилось повышение уровней сывороточных цитокинов: ИЛ-4 (>5,6 пг/мл), ИЛ10 (>35 пг/мл), ФНО-α (>14 пг/мл) и ИЛ-12р70 (>8,5 пг/мл). Следовательно, определенные интервалы параметров иммунитета могут служить критериями неблагоприятного течения болезни.

Таким образом, установленные связи между содержанием исследуемых цитокинов на системном и локальном уровнях с морфологическими показателями свидетельствуют о том, что из всех изученных в работе медиаторов, наибольшей значимостью для определения стадии фиброза обладают показатели содержания как в сыворотке, так и в супернатантах биоптатов печени ФНО-α, ИЛ-4, ИЛ-10 и ИЛ12р70. Следовательно, определение концентраций указанных цитокинов в сыворотке крови является альтернативным методом неинвазивного скрининга фиброза печени. Необходимо отметить, что выраженность фиброза находилась в зависимости от активности воспалительной реакции в области портальных трактов и не была связана с интенсивностью патоморфологических изменений в дольках печени. У больных с тяжелой стадией фиброза, несмотря на достоверное уменьшение количества резидентных макрофагов печени и гистологические признаки уменьшения их функциональной активности, генерируемые ими уровни провоспалительных цитокинов достигали максимума. Полученные данные свидетельствуют о клинической информативности определения сывороточной концентрации

цитокинов ИЛ-4, ИЛ-10, ИЛ-12р70 и ФНО-α и целесообразности использования данных показателей для дополнительной характеристики особенностей течения ХВГС, стадии заболевания и эффективности противовирусной терапии.

Мало известно значение матриксных металлопротеиназ (ММPs) и их специфических ингибиторов. Определение роли этих медиаторов в иммунопатогенезе ХВГ будет способствовать глубокому пониманию механизмов фиброгенеза печени, улучшению диагностики и оптимизации терапии пациентов с моно- и микстхроническими вирусными гепатитами. При анализе сывороточного уровня ММР-9 в крови у всех исследуемых пациентов с ХВГ нами обнаружено снижение данного показателя, средний уровень его составил 229,3±59,8 нг/мл, в отличие от аналогичного показателя в группе контроля – 376,1±46,4 нг/мл (p<0,05). При этом значительное уменьшение концентрации ММР-9 отмечено в группе пациентов со смешанными гепатитами – 197,4±32,4 нг/мл, а средний уровень его при моноинфекции С и В составил 209,5±29,2 нг/мл и 261,1±21,8 нг/мл, соответственно (p<0,05). Выявлена тенденция к снижению концентрации ММР-9 в крови у пациентов ХВГ с прогрессированием фиброза печени. Так, средний уровень ММР-9 при отсутствии фиброза печени (F0) составил 236,7±39,1 нг/мл, при фиброзе 1 стадии (F1) – 215,1±33,4 нг/мл, при F2 – 201,1±12,1 нг/мл, F3/F4 – 148,5±30,8 нг/мл (p<0,001), что достоверно отличалось от нормы. Обнаружена обратная сильная корреляционная связь между концентрацией ММР-9 и степенью выраженности фиброза у пациентов с ХВГ (rs = -0,8).

В современной литературе описано, что ТФР-β, представленный преимущественно первой изоформой, является плейотропным цитокином, биологические функции которого сопряжены с характером воздействующего на него стимула [33, 34]. К основным эффектам ТФР-β относится иммуносупрессия, которая заключается прежде всего в подавлении клеточного иммунного ответа, что, соответственно, препятствует адекватной противовирусной защите организма и элиминации ВГС [35]. Кроме того, показано иммуноопосредованное участие фактора роста в развитии и поддержании некровоспалительного процесса в органе-мишени, что способствует формированию фиброза печени и его прогрессированию [37]. Также продемонстрировано его прямое стимулирующее влияние на ключевые звенья фиброгенеза, а именно, клеточные механизмы, преимущественно клетки Ито, и систему ММП/ТИМП. При анализе сывороточного уровня изоформ указанного цитокина у пациентов с HCV-инфекцией по сравне-

нию с группой контроля были выявлены низкие показатели ТФР-β1 (р>0,05) и ТФР-β3 (р<0,001) при одновременно высокой концентрации ТФР-β2 (р<0,01). В ряде современных работ, напротив, показано увеличение содержания ТФР-β1 и снижение – ТФР-β2 в сыворотке крови [36]. Что касается ТФР-β3, то в доступной литературе нет исследований, посвященных изучению данного представителя ростового фактора при ХВГС. Полученные результаты, на наш взгляд, могут свидетельствовать о том, что ТФР-β оказывает свои эффекты не на системном, а на локальном уровне. Высокие значения ТФР-β2 у пациентов, инфицированных ВГС, по-видимому, являются компенсаторной реакцией на низкие показатели ТФР-β1 и ТФР-β3 в сыворотке крови, но в тоже время они могут быть маркером первичного звена реагирования на патологическое воздействие вируса.

С целью уточнения роли ТФР-β в иммунопатогенезе фиброза печени при ХВГС нами впервые проведено исследование локального профиля указанного цитокина у пациентов с данной гепатотропной вирусной инфекцией, в ходе которого зафиксировано повышение уровня всех трех изоформ изучаемого ростового фактора в сравнении с контрольной группой здоровых лиц. Обнаруженные результаты подтверждают данные литературы, в которых описано, что первоначально дисбаланс содержания «заинтересованных» цитокинов происходит в органе-мишени, где формируется иммунный ответ, и в последующем, при прогрессировании патологического процесса концентрация их может изменяться в сыворотке крови [1, 7, 10, 21].

Нами проведено комплексное исследование профиля системы ТФР-β у пациентов ХВГС одновременно и в сыворотке крови, и в супернатантах гепатобиоптатов в зависимости от выраженности фиброзных изменений в печени. Зарегистрированы разнонаправленные изменения показателей профиброгенного цитокина на системном и локальном уровнях с прогрессированием структурных изменений в архитектонике печеночной ткани. В частности, концентрация всех трех изоформ фактора роста в периферической крови статистически значимо снижалась (р<0,05) по мере ремоделирования ткани печени от начального (F0 ст.) к выраженному (F3-4 ст.) фиброзу печени, что согласуется с данными отечественных и зарубежных авторов, занимающихся изучением этого вопроса [36, 37]. В то же время аналогичные показатели в супернатантах гепатобиоптатов были увеличены (р<0,05).

Установленные системные изменения представителей семейства ростового фактора могут подтверждать плейотропную роль ТФР-β в иммунопатогенезе данной гепатотропной вирусной инфекции. Вы-

сокие сывороточные значения изоформ фактора роста при начальных HCV-ассоциированных фиброзных изменениях в органе-мишени (F0 ст.) относительно их содержания в группе пациентов с выраженной стадией фиброза и циррозом печени (F3-4 ст.) могут быть одним из механизмов, который способствует «ускользанию» ВГС из-под иммунного ответа организма-хозяина. А именно, избыток ТФР-β угнетает синтез цитокинов, обладающих защитным противовирусным эффектом, то есть ИЛ-2 и ИФН-γ, в то же время индуцирует продукцию ключевых медиаторов воспаления и клеточных иммунных реакций, прежде всего ФНО-α и ИЛ-10 [7, 10, 20]. Таким образом, учитывая данные обзора литературы и полученные нами результаты, можно обобщить, что ТФР-β в сыворотке крови, выполняя диаметрально противоположные эффекты (иммуносупрессивный и провоспалительный), на начальных стадиях патологического процесса способствует персистенции и хронизации HCV-инфекции. Дальнейшее прогрессирование ХВГС с формированием фиброза и цирроза печени сопровождается снижением системного уровня всех изоформ фактора роста, что, вероятно, связано с реализацией профиброгенного эффекта ТФР-β непосредственно в органе-мишени.

Обнаруженное в ходе нашего исследования увеличение концентрации изоформ ТФР-β на локальном уровне, на наш взгляд, обусловлена прогрессирующим нарушением архитектоники печеночной ткани. Так, при инфицировании ВГС с последующей персистенцией и хронизацией гепатотропной вирусной инфекции в органе-мишени развиваются стойкие некровоспалительные и клеточные иммунные реакции, которые приводят к структурным преобразованиям ВКМ в печени и изменению клеточного состава с преобладанием клеток Купфера и клеток Ито [7, 20, 34, 37]. Согласно данным ряда авторов видоизмененные компоненты экстрацеллюлярного матрикса являются индукторами синтеза, а стромальные клетки – продуцентами различного спектра медиаторов, в том числе представителей систем ТФР-β и ММП/ТИМП [14, 20, 36]. В свою очередь, избыток профиброгенного цитокина вызывает положительную обратную связь на клетки Ито, способствуя их устойчивости к апоптозу и трансформации в миофибробластные клетки, а следовательно, чрезмерному синтезу белка ВКМ [1, 15, 20]. Таким образом, замыкается «порочный круг», состоящий из профиброгенных клеток и системы ТФР-β, которые, стимулируя друг друга, приводят к прогрессированию HCVассоциированного фиброза печени в цирроз и ГЦК. Корреляционный анализ показателей изоформ ТФР-β на системном и локальном уров-

Copyright ОАО «ЦКБ «БИБКОМ» & ООО «Aгентство Kнига-Cервис»

нях в зависимости от стадий фиброза печени при ХВГС обнаружил статистически значимые (р<0,05) обратные связи в сыворотке крови и прямые – в органе-мишени (рис. 13).

Таким образом, результаты наших исследований могут свидетельствовать о ключевой роли плейотропного ТФР-β в иммунофиброгенезе печени при HCV-инфекции.

Рис. 13. Корреляционные связи между показателями изоформ ТФР-β на системном и локальном уровнях и стадиями фиброза печени при ХВГС.

Цитокиновый статус и маркеры оксидативного стресса при хроническом вирусном гепатите С

Важным компонентом внеклеточной антиоксидантной системы (АОС) являются белки острой фазы воспаления (БОФ). Эти белки представляют собой наиболее древнюю форму иммунобиологической защиты организма и считаются одной из важных систем иммунного гомеостаза [6, 11]. В настоящее время к группе БОФ относят более 30 различных белков. Среди них выделяют транспортные белки, неспецифические ингибиторы сывороточных протеаз, белки системы комплемента, С-реактивный белок, α1-кислый гликопротеин (α1-КГП), сывороточный амилоид А, фибриноген и др. [11, 25]. Известно, что уровень α1-КГП повышен при инфекционных процессах, в том числе