Материал: Методичка Часть 2 леч пед МПФ. Част МБ и ВИР

З А Н Я Т И Е 1

Дата ______________

Тема: ООИ. Микробиологическая диагностика чумы, туляремии

План занятия:

1. Возбудитель чумы. Морфология - демонстрация готовых препаратов-мазков.

2. Знакомство со свойствами возбудителей псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза.

3. Возбудитель туляремии. Морфология - микроскопия готовых препаратов-мазков из чистой культуры и из органов зараженных животных.

4. Правила взятия материала, пересылки в лабораторию и условия работы с возбудителями особо опасных инфекций.

5. Знакомство с иммунопрепаратами, применяемыми для диагностики, профилактики и лечения чумы, туляремии (диагностикумы, аллергены, вакцины, сыворотки).

Методические указания

1. Промикроскопировать готовые препараты-мазки возбудителя чумы и зарисовать в рабочую тетрадь. Обратить внимание на морфологию и тинкториальные свойства микроорганизма.

3. Промикроскопировать готовые препараты-мазки возбудителя туляремии из чистой культуры и из органов зараженных животных. Зарисовать в рабочую тетрадь. Обратить внимание на морфологию и тинкториальные свойства микроорганизма.

Контрольные вопросы

Каковы морфологические особенности палочки чумы и ее культуральные свойства? Что такое пестин и для какой цели он применяется?

Какой материал берется для бактериологического исследования при различных клинических формах чумы?

Какие микробиологические методы используются для диагностики чумы? Каковы основные пути заражения человека возбудителем чумы?

Как осуществляется специфическая профилактика чумы?

Какие признаки используют для дифференциации возбудителя чумы от возбудителей ложного туберкулеза грызунов и кишечного иерсиниоза?

Какие подвиды чумных бактерий Вы знаете?

Каковы морфологические культуральные и биохимические свойства возбудителя туляремии?

Какой материал берется от больного при различных клинических формах туляремии? Каковы особенности выделения возбудителя туляремии от больного человека?

3

Какие микробиологические методы используются для диагностики туляремии? Как осуществляется серологическая диагностика туляремии?

Какие препараты используются для аллергической диагностики туляремии? Как ставятся и оцениваются аллергические реакции?

На какой день заболевания рекомендуется ставить реакцию агглютинации и аллергическую пробу при туляремии?

Каковы общие правила взятия, пересылки материала и лабораторного режима при особо опасных инфекциях? В чем заключаются особенности работы с больными чумой и зараженными животными?

Какие вакцины используются для профилактики чумы, туляремии и как они применяются?

Методы микробиологической диагностики чумы

А. Бактериологический

Материал: от больных - пунктат из бубона, мокрота, кровь из вены; от трупов - кусочки органов, лимфоузлы, кровь, костный мозг.

Б. Биологический

Исследуемый материал (см. метод А)

В. Аллергический

(для ретроспективной диагностики) – проба с пестином.

Г. Серологический

Применение иммунологических реакций для обнаружения антигенов возбудителя (РПГА и ее модификации, ИФМ, РИМ).

5

Методы микробиологической диагностики туляремии А. Бактериологический и биологический

Материал: пунктат из бубона, гной из конъюнктивы, пленка из зева

Б. Серологический

Реакция агглютинации по типу реакции Райта (с 10-12 дня заболевания, диагностический титр 1:100)

В. Аллергический

Аллергическая проба с тулярином – накожная и внутрикожная (с 5-7 дня заболевания).

Приложение к ЗАНЯТИЮ 1

А. Иерсинии - возбудители псевдотуберкулеза (Yersinia pseudotuberculosis) и кишечного иерсиниоза (Y. enterocolitica)

Эти два вида иерсиний играют значительную роль в патологии человека. Бактерии представляют собой полиморфные, не образующие спор грамотрицательные палочки,

6

имеющие часто овоидную форму. Клетки в старых культурах окрашиваются неравномерно. Бактерии псевдотуберкулеза, взятые с влажного агара, могут иметь биполярную окраску, образуют капсулу, но с различной степенью выраженности. Оба вида бактерий обладают подвижностью, обусловленной наличием перитрихиальных жгутиков. Подвижность выявляется посевом в столбик полужидкого агара уколом, но только при 18-20ºC , при 37°C подвижность отсутствует.

Иерсинии неприхотливы к питательным средам, хорошо растут на обычных универсальных средах, способны активно размножаться в почве и воде. Оптимальная для роста температуре 30ºС, верхняя и нижняя границы роста составляют 43°С и 0-2°С соответственно, оптимум рН 6,6-7,8. На среде Эндо колонии имеют диаметр 0,1-0,2 мм, круглые выпуклые, блестящие с ровными краями, бесцветные (не ферментируют лактозы). Колонии возбудителя псевдотуберкулеза, находящиеся в R-форме, почти не отличаются от колонии возбудителя чумы (пигментированный центр и фестончатый "кружевной" край). Биохимические различия трех видов иерсиний представлены в таблице.

Все три вида иерсиний отличаются и по своим антигенным свойствам.

Возбудитель псевдотуберкулеза по O-антигенам разделяется на восемь групп (1-8) с 20 O-факторными антигенами (1-20). По O- и Н-антигенам (а-е) этот вид подразделяют на

13 сероваров и подсероваров (la, 1в, 2а, 2в, 2с, 3, 4а, 4в, 5а, 5в, 6, 7, 8).

Y. enterocolitica характеризуется антигенной неоднородностью по 0-антигену. В настоящее время различают более 30 сероваров этого вида. Большинство из них адаптированы к некоторым видам животных или широко распространены во внешней среде. Подавляющее большинство штаммов, выделенных от человека, принадлежат к сероварам 03

и09, реже встречаются серовары 08, 05в и очень редко - серовары 01, 02, 06, 07, 010, 011,

013, 014, 015, 016, 017.

От людей, больных псевдотуберкулезом, чаще всего выделяются штаммы, относящиеся к серовару 1, реже 3 и 4.

Входе эволюции у иерсиний закрепилась необходимость существования в двух средах обитания - внешней (сапрофитическая фаза жизни) и в организме теплокровных животных и человека (паразитическая фаза). Для осуществления паразитической стадии иерсинии должны проникнуть в организм теплокровного животного. Заражение возбудителем псевдотуберкулеза чаще всего происходит при употреблении в пищу инфицированных иерсиниями продуктов, хранившихся при пониженной температуре (4-12ºС) в холодильниках и овощехранилищах. В этих условиях бактерии в силу своей психрофильности могут размножаться и накапливаться в пищевых субстратах.

Иерсинии при пониженной температуре обладают высоким потенциалом клеточной

итканевой инвазивности и способны сохранять высокий уровень вирулентности, однако возбудитель может проникнуть в организм человека и через любые слизистые оболочки, вероятно, за счет неспецифических механизмов.

Основным источником иерсиниозов являются дикие и синантропные грызуны, домашние и сельскохозяйственные животные. Возможно заражение человека от человека. Штаммы Y. pseudotuberculosis выделены от 175 видов млекопитающих, 124 видов птиц, 7 видов рыб. Зараженные грызуны, животные и люди выделяют возбудителя с испражнениями и мочой, загрязняя воду, растения и другие объекты внешней среды. Таким образом, пищевой путь в передаче возбудителей псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза является ведущим. Заражение происходит в результате употребления в пищу сырых или недостаточно термически обработанных продуктов (мяса, мясных продуктов, молока, овощей, фруктов, зелени). Оба вида возбудителя способны существовать внутри растений (салата, гороха, овса и т.п.).

Заболевания, вызываемые иерсиниями, характеризуются полиморфностью клинических проявлений, поражением желудочно-кишечного тракта, тенденцией к генерализации, септикопиемии и поражению различных органов и систем.

7