Тиндализация, или дробная стерилизация, была предложена в 1877 г. Дж. Тиндалем. Она применяется для сред, портящихся при д-вии т выше 100 °С. Тиндализацию осущ текучим паром в автоклаве с незавинченной крышкой или в кипятильнике Коха. Среды прогревают несколько раз по 10-15 мин. Между прогреванием среды ставят в термостат при т 30°С на 8-12 ч для прорастания жизнеспособных спор. Среды, не выдерживающие нагревания при 100°С, прогревают более осторожно: при 60-80°С через каждые 8-12 ч 4-5 сут подряд. При 1ом нагревании погибают вегетат формы микроорг, при послед — вновь появившиеся вегетат формы. Вследствие длит этот способ в аптеках применяется редко. Тиндализация - метод дробной стерилизации при т ниже 100С. Она испол для стерилизации объектов, кот не выдерживают 100С: сыворотка, асцитич жидкость, вит. проводится в водяной бане при 56С по 1 ч 5-6 д.
кипячение - погибают только вегетат формы бак, споры могут выживать; метод применяется для обработки игл, инструментов многораз испол (кипячение в теч 30 мин с добавлением в воду 1% бикарбоната натрия), для обработки некот инъекцион р-ров (не переносящих автоклавирования), кот до стерилизации должны отвечать очень высокому стандарту чистоты. Для стерилизации пит сред этот метод не применяется. Этим способом стерилизуют резиновые предметы, хирургич инструментарий, стеклян посуду. Примен кипячение для стерилизации инъекцион р-ров не рекомендуется, т к по эффективности оно значительно уступает стерилизации паром. Фильтрование - освобождение жидкостей от микробов в тех случаях, когда материал не м б подвергнут нагреванию (сыворотка, ряд лек р-ров). Фильтры имеют настолько малые поры, что задерживают микробы, но вирусы проникают через них. Поэтому фильтрат от вирусов не освобождается. производится или под повыш давлением, и жидкость нагнетается через поры, или создается разрежение, и жидкость всасывается через фильтр в приёмник. Стерильность профильтрованной жидкости проверяется путем посева её на пит среду. Фильтры и приёмники д б стерильными. Пастеризация - способ основан на том, что при нагревании до 50-60°С в теч 30 мин, или 70-80°С – в теч 5-10 мин, или 90°С - 2 мин погибает бол-во бесспоровых микробов. Споры остаются жизнеспособ. Метод примен для пастеризации молока, вина, компотов. Пастеризован продукты нужно хранить на холоде, чтобы не проросли споры. Пастеризация - частичн стерилиз, кот проводится при относит низкой т однократно.
Для контроля стерилизации испол: 1. Физ методы – максимальные и контактные термометры. 2. Химич в-ва как темпер индикаторы. Это порошкообразные в-ва со строго опред т плавления: бензонафтол (110°С), антипирин (113°С), резорцин и сера(119°С), бензойная к-та (120°С). Эти в-ва смешивают с небольшим кол-вом сухой анилиновой краски (фуксин, метиленовый синий) и помещают в запаянные стеклянные трубочки, кот укладывают между стерилизуемыми предметами. Этот метод испол для контроля режима стерилизации в автоклаве. Если т в автоклаве была достаточной, в-во в трубочке плавится и окрашивается в цвет красителя, кот растворяется в этом в-ве. 3. Биологич методы–испол термостойкой спорообразующей тест культуры – Bacillus stearothermophilus. Его споры погибают при 121°С за 15 мин при их содержании в 1 мл среды 106 кл. Биологич тест испол для контроля режима стерилизации в печи Пастера. Пробирки с полосками марли, фильтр бумаги, с шелковой нитью, зараженные спорами, помещают в шкаф между стерилиз предметами. После стерилизации в пробирку вносят питат бульон и наблюдают за ростом микроорг.
Дезинфекция – уничтожение патогенных микроорг в объектах окр среды для прерывания путей передачи инф с помощью химич в-в. Химич в-ва, кот испол для дезинфекции, называются дез в-вами. Они нарушают физико-химич структуру микробной кл. По механизму д-вия дез в-ва делят на след гр: 1.Окислители – повреждают сульфгидрильные гр белков. К ним относятся галогены (хлор, бром, йод) и их соед, перекись водорода, перманганат калия. 2. Поверхностно-активные в-ва – повреждают клет стенку. К ним относятся бактерицидные мыла, сульфонол, амфолан, твины. 3. Соли тяжелых метал – вызывают коагуляцию белков, образование нерастворимых альбуминатов. К ним относят соли ртути, серебра, меди, свинца. Их применение ограничено при наличии дополнит белков, кот затрудняют доступ к возбуд. 4. Фенол, крезол и их производные – повреждают клет стенку, растворяют липиды цитоплазматич мембраны, нарушая ее полупроницаемость, а затем повреждают белки, вызывая гибель микробов. 5. Щелочи, известь – приводят к набуханию и растворению белков. Их применение ограничено из-за повреждающего д-вия на различные предметы (посуду). 6. Красители – обладают сродством к фосфорнокислым гр, повреждают нуклеопротеиды и вызывают гибель микроорг. К ним относятся бриллиантовый зеленый, метиленовый синий, риванол, трипофлавин. К наиб распростр дез в-вам относят хлорная известь (0,1–10% р-р), хлорамин (0,5–5% р-р), фенол (3-5% р-р). лизол (3-5% р-р). двутретьосновная соль гипохлората кальция (ДТСГК (0,1-10% р-р). 0,1 – 0,2% р-р сулемы. соед ртути, 70° этил спирт. В микробиологич практике дез в-ва испол для обработки посуды (пипетки, предмет стекла), рабоч места, рук. Выбор дез в-ва, длит его воздействия опред особен микроорг и той средой, в кот он находится (н, мокрота). Химич в-ва также испол для консервации лс. К консервации прибегают в тех случаях, когда невозможна стерилизация лек-в или невозможно изготовление их в упаковке одноразового испол. Для консервации применяют неорганич соед (соли тяжелых металлов, серебра, ртути), металлоорганич соед (мертиолат, фенил ртутные соли), органич соед (спирты, фенолы). Консерванты должны отвечать след требованиям: 1) д б фармакологически инертными; 2) иметь широкий спектр антимикробного д-вия; 3) не взаимодействовать с лв; 4) поддерживать стерильность лекарства в течение всего времени его применения.
Воздух: Обнаруживаются кокковид и палочков бак, бациллы, клостридии, актиномицеты, грибы и вирусы. ф-р передачи респираторн инф, возбуд передается воздушно-капел или возд-пыл путем. Солнеч лучи и др ф-ры способствуют гибели микрофлоры воздуха. может служить ф-ром передачи патоген микробов - стафилок, стрепток, палочек дифтерии, кокклюша, тубика, вирус кори и гриппа. Микрофлора меняется в зависимости от микрофлоры поверхн данного участка земли, климатич условий, вр года и др ф-ров. Чем больше в воздух попадает с поверхн земли пыли, тем больше в нем микробов. Воздух густонаселенных местностей крупных городов богат микроорг, меньше загрязнен воздух сельск местности. Кол-во микроорг в воздухе уменьш по мере удаления от населенных мест. Зимой в воздухе микробов находится гораздо меньше, чем летом. вода: Состав микрофлоры воды зависят от химич состава воды, т, содержания CO2 и O2, рН, облучения солнеч лучами, содерж питат в-в, флорой и фауной, глубиной водоёма, выпуском сточных и промыш вод. В пресных водоёмах (реки, озёра) норм обитателями явл Micrococcus roseus и др. микрококки, Pseudomonas fluorescens , извитые формы (Sp. rubrum). В водах пресных водоемов обнаруживаются различные бак: палочковидн (псевдомонады), кокковид (микрококки) и извитые. Загрязнение воды органич в-вами сопровождается увелич анаэробных и аэробных бак, а также грибов. Микрофлора воды выполняет роль активного ф-ра в процессе самоочищения ее от органич отходов, кот утилизируются микроорг. Вместе с загрязненными ливневыми, талыми и сточными водами в озера и реки попадают предст норм микрофлоры чела и животных (киш палочка, энтерококки) и возбуд киш инф, (брюш тифа, паратифов, дизентерии, холеры). явл ф-ром передачи возбуд многих инфекц заб. Вода артезианских скважин не содержит микроорг. Почва: явл основ средой обитания многих микроорг, с раст и животн биогеоценоз. принимает активное участие в процессах формирования и самоочищения, а также в круговороте в-в в природе (азота, углерода, серы, железа и др соед). Значение - микробы осущ разложение и минерализацию органич животных и растит остатков, осущ очищение от нечистот и отбросов. Микрофлора почвы по колич-ному и видовому составу значительно колеблется в зависимости от региональных и климатич условий, химич состава и физич св-в почвы, р-ции (рН), т, влажности, степени аэрации. Микроорг распростр по горизонтам почвы неодинаково. Меньше микроорг содержится в поверхностном слое почвы толщиной несколько мм, где они подвергаются неблагоприят возд-вию солнеч света и высушиванию. Чем глубже почвен горизонты, тем беднее они органич в-вами, доступ воздуха в них затруднен, поэтому здесь численность анаэробных бак увелич. Микрофлора почвы предст разнообразн видами бак, актиномицетов, грибов, водорослей и простейших животных.К постоян обитателям почвы относ различные гнилостные, преимущественно спорообразующие, аэробные и анаэробные бак; бак, разлагающие клетчатку; нитрифицирующие, денитрифицирующие, азотфиксирующие, серо- и железобак. патоген микроорг могут длит сохр в почве:1. Возбуд ботулизма, актиномицеты, грибы-возбуд микозов. 2. Спорообразующ бациллы и клостридии, кот попадают в почву с выделениями чела и могут длит здесь сохр в виде спор (возбуд сибир язвы, клостридии столбняка и газовой анаэробной инф) 3. Неспорообразующ бак, вирусы, попадающие в почву с выделениеми чела и животных и сохр в почве несколько дней и месяцев.
Санитарно-показат микроорг (СПМ)–это предст норм микрофлоры, кот выделяются естествен путем в окр среду и там сохр, поэтому служат показателями санитарного неблагополучия, потенциальной опасности исслед объектов. Санитарно-показательные бак окр среды. 1.Вода – бак гр кишеч палочки (БГКП), энтерокок, стафилок. 2.Почва – БГКП, энтерококки, термофилы, возбуд газ гангрены. 3.Воздух – бета-гемолитич стрептококки, стафилококки. 4.Пищ продукты – БГКП, энтерококки, стафилококки, протей. 5.Предметы обихода – БГКП, фекал стрептококки, стафилок. Все патоген микроорг, находящиеся в почве, можно разделить на след гр: · микрофлора, кот становится частью природной экосис-мы (бак Clostridium botulinum, актиномицеты); · патоген микробы, попадающие в почву с трупами и выделениями животных и чела, сохр в ней длит вр (возбуд столбняка, сибир язвы, тубика, бруцеллеза, газ гангрены); · патоген микроорг, кот также попадают в почву с трупами и выделениями, но сохр в ней короткий промежуток вр (сальмонелла, кишеч палочка, холерный вибрион и др). Норм микрофлора орг чела предст собой стабильное сообщество микроорг, т.е. микробиоценоз. Резидентная (постоянная) облигатная микрофлора представлена микроорг, постоянно присутствующ в орг. Транзиторные микроорг- микроорг, кот обитают на коже или слиз оболочках в теч от нескол ч до нед. Потенциально опасные микроорг- те микроорг, кот при опред условиях, н, сниж иммун и неправил леч, приводят к возникновению различных заб.
1. Дистил вода, испол для изготовл лс (кроме лек-в для инъекций и глаз капель). Пробы отбирают в кол-ве 300 мл в стерильные бутылки с последующ закрытием ватн пробками и бумаж колпачками. Пробы отбирают из бюретки (или трубопровода), конец кот предварительно обжигают ватой, смоченной спиртом. Опред кол-ва мезофильных аэробных и факультативно анаэробных бак. Исслед воду вносят по 1 мл в 2 стерил чашки Петри, затем заливают растопленным МПА. После застывания агара чашки выдерживают сут при 37ºС и ещё сут при комнатн т. После этого подсчитывают число выросших колоний как на поверхн, так и внутри пит среды. При вычислении результатов анализа выводят среднее арифметическое из числа колоний, выросших на обеих чашках. Для выявления плесневых и дрожжевых грибов засевают по 0,5 мл исслед воды на 2 чашки со средой Сабуро и инкубируют при 20-22ºС в теч 3-4 сут. Затем подсчитывают число колоний плесневых и дрожжевых грибов на обеих чашках. Результаты оценивают путём суммирования числа бак и грибов. Опред титра бак гр киш палочки (БГКП) проводится по методике для пить воды. Оценка результатов проводится в соответ с требованиями ГОСТ «Вода питьевая». 2. Дистил вода для приготовления инъекц р-ров и глаз капель. Инъекц р-ры до стерилизации. Глаз капли, приготовленные в асептических условиях на стерильных основах. Пробы дистил воды отбирают в стерильные флаконы в кол-ве 15-20 мл. Инъекц р-ры (до стерилизации) отбирают во вр их приготовления, но не позднее 1,5 ч, и доставляют в лаб в тех же флаконах, в кот они будут подвергнуты стерилизации. Глаз капли доставляют в аптечной упаковке. Опред кол-ва мезофильных аэробов и факультативных анаэробов .Опред наличия БГКП в 1 мл проводится след обр. Исслед материал в кол-ве 1 мл засевают в 9 мл разведённой среды Эйкмана. Посевы выращивают при 37ºС в теч сут, затем высевают на среду Эндо и после суточ инкубирования чашек при 37ºС отбирают на чашках подозрительные колонии бак и опред их принадлежность к БГКП. Колич-ное опред БГКП проводится след обр. 1 мл исслед материала наливают в стерил чашку Петри и заливают растопленной средой Эндо. После застывания среды её инкубируют при 37ºС в теч сут и учитывают кол-во типичных колоний. Предельно допустимые кол-ва микроорг в 1 мл: дистил вода, испол сразу же после перегонки, не более 15, испол после стерилизации для изготовления асептическим способом глазных капель - не более 3, р-ры для инъекций до стерилизации не позднее 1,5 ч после изготовления – не более 30. Наличие киш палочки, золотистого стафилококка, синегнойн палочки и протея в данной гр исслед материалов недопустимо. 3. Инъекц р-ры и глаз капли после стерилизации доставляются для исслед в аптечной упаковке. Материалы этой группы д б стерильными. 4. Отбор сухих лв производят по показаниям. Стерильными ложками в стерильную посуду лаб отбирают 30-50 г в-ва. Если в-во таблетированное, отбирают фламбированным пинцетом в стерильную посуду лаб в таком же кол-ве. 5. Аптечную посуду, подготовленную для разлива инъекц р-ров и глазн капель, отбирают в момент приготовления их в кол-ве 3 штук одинаковой ёмкости. Флаконы доставляют в лаб в укупоренном виде, испол при этом аптечные пробки и прокладки. Доставленные в лаб флаконы послед ополаскивают 10 мл стерильной водопроводной воды. Воду из флакона во флакон переливают над пламенем горелки, тщательно ополаскивая каждый флакон. Пробки (корковые и полиэтиленовые) и прокладки отбирают в момент приготовления инъекц р-ров и глаз капель фламбированным пинцетом и помещают по 5 штук в широкогорлые стерил колбы или банки с последующим закрытием стерил ватно-марлевыми пробками и бумаж колпачками. В лаб в колбы или банки наливают 10 мл стерильной водопроводной воды и тщательно ополаскивают. Испол в аптеках пипетки прополаскивают несколько раз в пробирке, содержащей 10 мл стерильной водопроводной воды, пробирки со смывной жидкостью доставляют в лаб. Число колоний, уст в 1 мл смывной жидкости, умножают на 10- содержанию бак на всей смывной поверхности. Кол-во бак не должно превышать 150. Опред наличия БГКП: 8 мл оставшейся смывной жидкости засевают в 1 мл концентрированной среды Эйкмана, инкубируют при 37ºС в теч сут и в дальнейшем идентифицируют БГКП. Наличие бак гр киш палочки не допускается. 6. Смывы с инвентаря, оборудования, рук персонала (во вр приготовления лф), санитарной одежды осущ с помощью ватных тампонов, помещённых в пробирки с физр-ром. Влажным тампоном протирают исслед поверхность, затем тампон помещают в среду Кесслера или Кода. После инкубации в термостате пересевают на среду Эндо и опред наличие БГКП. Опред патогенных (золотистых) стафилококков осущ путём посева смыва в пробирку с солевым МПБ. После инкубации в термостате опред наличие стафилококков. Колич-ные опред их не проводятся. Наличие БГКП и стафилококков не допускается. 7. Исслед воздуха. Отбор проб воздуха производится при соблюдении след условий: - чистое подготовленное к работе помещение; - закрытые форточки и двери; - ур высоты отбора воздуха соответст высоте раб стола. 8. Методы микробиологич контроля лс. Присутствие микробов в лс нежелательно, за искл тех, в кот наличие микробов специально имеется в виду. необходим контроль. Контроль проводится в соответст с Гос-ной фармакопеей. Лс, стерилиз в процессе производства, испытывают на стерильность, а инъекц р-ры - также и на пирогенность. Лс, не стерилизуемые в процессе производства, м б контаминированы микроорг и поэтому д б испытаны на микробную чистоту.
Ист микробного загрязнения: • воздух помещений. в 1 л воздуха в большом городе содержит от 1 тыс. до 1 млн. разных частиц, кот явл носителями микрофлоры – 1 микроорг приходится на 1000 взвешенных частиц; • исходные лек-ные и вспомогат в-ва животного, растит и синтетич происхожд • дисперсионные среды, в т ч вода очищенная, микробная контаминация кот происходит при транспортировке, хранении; • вспомогат материалы (фильтрующие – вата, бумага, марля; упаковочные – бумага, флаконы, банки, коробки, пробки); • чел. В спокойном состоянии чел в 1 мин выделяет до 200 тыс. разных частиц (чешуйки, кл эпидермиса), при движении – до 1 млн., поэтому присутствие в торговом зале аптеки значительного кол-ва посетителей, занос извне пыли, грязи приводит к увелич в воздухе микрофлоры, проникающей и в производствен помещения; • персонал аптеки. Даже в спец одежде в чистых помещениях в окр среду сотрудники выделяют до 2 млн. частиц размером от 0,5 мкм до 5 мкм, 300 тыс. частиц размером 5 мкм и более 160 частиц, на кот находятся микроорг. • Ист загрязнения в основном – рот и нос. При разговоре кол-во частиц, выделяемых челом, возрастает; • технологич процесс (оборудование, приборы, аппараты). Правила хранения лек-ного сырья.1.Лек-ное растит сырье должно храниться в сухом, хорошо вентилируемом помещении в хорошо закрытой таре, в аптеках - стеклян, металлич, в ящиках с крышкой, на складах - в тюках или закрытых ящиках на стеллажах. Резаное сырье хранят в ткан мешках, порошков - в двойных мешках: внутр - бумажный, многослойный, наруж - ткан, картонных упаковках. В зависимости от физико-химич св-в лек-ного растит сырья допускается упаковка из полимерных материалов. 2.Лек-ное растит сырье, содержащее эфирн масла, хранят изолированно в хорошо укупоренной таре. 3. Некот гигроскопич травы, листья и плоды необход хранить в стеклян или металлич таре хорошо укупоренными. 4. При хранении высушенных сочных плодов, для предотвращения порчи их амбарными вредителями, рекомендуется помещать в ящики с плодами флакон с хлороформом, в пробку кот вставлена трубочка для улетучивания паров хлороформа. Хлороформ добавляют по мере его улетучивания. 5. Готовые лек-ные растит сборы хранят в аптеках и аптечных складах с соблюдением общих правил. 6. Лек-ное растит сырье должно подвергаться периодич контролю в соотв с требованиями ГФ. Трава, корни, корневища, семена, плоды, утратившие норм окраску, запах и требуемое кол-во д-вующих в-в, а также пораженные плесенью, амбарными вредителями, в зависимости от степени поражения, либо бракуют, либо после переработки и контроля испол. 7. Особое внимание при хранении следует уделить лек-ному растит сырью, содерж сердеч гликозиды. Для них ГФ уст более строгие сроки хранения и повтор переконтроля на содержание биологич активности. 8. Ядовит и сильнод-вующее лек-ное растит сырье хранят в отдельном помещении или отдельном шкафу под замком. Микроорг явл 1им из д-вующих ф-ров внеш среды. При неблагоприят санитарно-гигиенич условиях они могут отрицат влиять на кач-во, изготовляемых лек-в в аптеках, и служить причиной возникновения внутриаптечных инф. ущерб препаратам наносят сапрофитные микроорг, разрушающие лек-ва и испол их как питат в-ва для своего роста и развития. Такие лек-ва теряют свою терапевтич активность, а иногда приобретают токсич св-ва. многие микроорг активно разлагают сульфаниламидные препараты и алкалоиды. Ряд микробов меняют химич состав лек-в, восст хлорит кальция до хлорида кальция. Причиной микробного обсеменения готовых лек-в м б микробное загрязнение растит лек-ного сырья, воздуха производствен помещений, оборудования, посуды, дистил воды, рук персонала. Микробной порче подвергаются готовые лф: сухие (порошки, сборы), жидкие (микстуры, настои, отвары, капли), мягкие (мази, пасты, шарики, свечи) и стерильные инъекц препараты. Лек-ва с высокой обсемененностью микробами, особенно патогенными, могут вызывать инфекц заб у людей. Из жидких инъекц лф легче всего обсеменяются микробами настои и отвары; при их хранении появл признаки порчи: муть, изменение цвета, пленка, необычный запах. Срок хранения этих препаратов ограничен. Спирт настойки меньше подвержены порче вследствие антимикробного д-вия алкоголя. Сухие порошкообразные в-ва, особенно тальк и крахмал, мягкие лф также подвержены микробному загрязнению. Их микроб порча носит очагов характер и проявл изменен цвета и консистенции в-ва.
Лс для инъекций, глаз капли, мази, плёнки, др лс, в отношении кот имеются соответст указания в нормативно-технич документации (НТД), д б стерильными. Отбор образцов для анализа.Число образцов из каждой серии от 3до40,в зависимости от метода стерилизации, для автоклавированных ср-в - 10. Для исслед лс д б приготовлены в виде р-ров, суспензий или эмульсий. Опред антимикробного д-вия лс. Во избежание неправильной оценки результатов анализа необход опред однократно для каждого наименования лс обладает ли оно антимикробн д-вием. Для опред антимикробного д-вия из ампулы с лс следует внести по 1 мл в 3 пробирки с 10 мл тиогликолевой среды и в 1 пробирку с 10 мл жидкой соево-казеиновой среды или среды Сабуро. Для контроля в 3 пробирки с тиогликолевой средой и в пробирку с 10 мл жидкой соево-казеиновой среды или среды Сабуро вносится по 1 мл стерильной дистил воды. Затем во все пробирки следует внести по 0,1 мл взвеси тест-штамма, содерж 1000 кл в 1 мл. В пробирки с тиогликолевой средой вносятся штаммы Staphylococcus aureus; Bacillus subtilis; Escherichia coli; в пробирки с соево-казеиновой средой или средой Сабуро - Candida albicans. Посевы в тиогликолевой среде инкубируют при 30-35ºС в теч 2 сут, а на соевоказеиновой среде, или среде Сабуро, - при 20-25ºС в теч 3 сут. При отсутст антимикробного д-твия лс в опытных и контрол пробирках должен наблюдаться рост перечисленных тест-микробов. В этом случае можно продолжать исслед и провести прямой посев данного лс на стерильность.
Опред антимикробной активности а\б основано на их способности угнетать рост микроорг. Опред проводят методом диффузии в агар на плот пит среде путем сравнения размеров зон угнетения роста тест-штаммов микроорг, кот образуются при испытании р-ров стандартного образца и испытуемого препарата опред концентраций. Метод основан на логарифмич зависимости размеров зон угнетения роста тест-микроорг от концентрации а/б, кот д б линейной. Антимикробная активность а/б выражается в единицах д-вия ЕД или "мкг" на единицу объема препарата. Для бол-ва а/б 1 ЕД или 1 мкг соответст 1 мкг активного в-ва (к-ты или основания); для а/б, имеющих иное колич-ное выражение единицы, соответст указания даются в фармакопейных статьях. При опред антимикробной активности а/б испол стандартные образцы, активность кот уст в соответствии с международными биологич стандартами. При отсутст последних для указанных целей м б испол химич стандартные образцы, антимикробную активность кот рассчитывают нa основании показателей кач-ва, уст физико-химич методами. Антимикробную активность стандартных образцов а/б, не имеющих аналогов в международной коллекции стандартов, рассчитывают также на основании показателей кач-ва, уст физико-химич методами. Стандартные образцы а/б хранятся и испол в соответствии с рекомендациями, указанными на этикетке стандартного образца.
В отношении лс, не стерилизуемых в процессе производства, проводится испытание на микробиологич чистоту. вкл в себя колич-ное опред жизнеспособных бак и грибов и выявление опред видов микроорг, наличие кот недопустимо в нестерильных лс. проводят в асептич условиях. Лс, обладающие антимикробным д-вием, и консерванты, входящие в состав некот лс, могут подавлять рост отдельных видов микроорг при проведении испытаний. Во избежание неправильной оценки результатов испытания опред д-вие лс в отношении тест-микробов. Для испытания антимикробного д-вия лс, не стерилизуемого в процессе производства, применяют тест-микробы: B.subtilis, B.cereus, E.coli, S.aureus, Salmonella abony, Candida albicans, Aspergillus. Предварительно готовят разведения лс: 1:10, 1:50, 1:100, 1:500, 1:1000. В пробирки с пит средами вносят по 1 мл каждого разведения, в контрол пробирки – по 1 мл стерил дистил воды. Затем во все пробирки вносят по 0,1 мл микробной взвеси тест-штамма. При обнаружении антимикробного д-вия лс устраняют его и после этого производят посев на микробиологич чистоту. При отсут антимикробн д-вия производят прямой посев. Колич-ное опред бак и грибов проводят двухслойным агаровым методом в чашках Петри