Материал: Вашков В.И. Антимикробные средства и методы дезинфекции при инфекционных заболеваниях

бацилл. С целью обеззаражи,вания белье погружают в

бак с дезинфицирующим раствором последовательно, од­

ну вещь за другой, следя, чтобы между вещам·и не об­

разовались воздушные прослойки, препятствующие про­ цессу дезинфекции. Одновременно между слоями белья кладут (сверху, в середине и внизу) мешочки с зара­ женными тест-объектами. Через определенные пром~­ жутки (15, 30, 60 мин и более) мешочки с тест-объекта­

ми извлекают одновременно из трех слоев. Тест-объект

вынимают стерильным пинцетом из мешочка, нейтрали­

зуют или промывают его в стерильной водопроводной

воде, после чего помещают в питательный бульон.

В контрольных опытах белье погружают в водопровод­

ную воду. Мешочки с тестам·и закладывают так же, как

и в основном опыте. Посевы выращивают при 37 °С в те­

чение 7 сут. При наличии роста производят посев на твердые питательные среды и идентифицируют культуру.

Эффективным считают средство, обеспечивающее ги­ бель 100% рабочих культур в обеззараживаемом белье.

При получении положительных данных (гибель 100% рабочих штаммов) в опытах по обеззараживанию белья,

зараженного чистыми культурами, переходят к опытам

по обеззараживанию загрязненного белья. С этой целью к 6 мл взвеси 2-миллиардной суточной культуры золо­ тистого стафилококка или споровой взвеси антракоида прибавляют 4 м.u инактивированной сыворотки, смеши­ вают их и заливают полученной взвесью тест-объекты

из расчета 20 мл на 10 тест-объеrпов. При рабt1те с куль­

турой кишечной· палочки к 6 мл добавляют 4 мл 40%

эмульсии кала (8 г кала растирают в ступе с 20 м.:r во­ ды). Зараженные тест-объекты подсушивают при теч­ пературе 37 °С в течение 20-25 мин. Опыты по обезза­

раживанию загрязненного белья и контроль эффектив­

ности проводят как и при обработке чистого белья. Определение активности средств при обеззаражива­

нии посуды. Активность дезинфицирующих средств при

обеззараживании посуды изучают с целью разработки эффективных режимов обеззараживания ее в зависимо­

сти от наличия и отсутствия остат~ов пищи на ней, тем­

пературы растворов, времени обработки, концентрации действующего начала.

Для обеззараживания посуды в качестве тест-объек­

тов используют тарелки, стаканы, эмалированные круж­

ки, ножи, вилки, ложК'и. Вначале чистую посуду (тарел-

60

ки, стаканы) заражают 2-миллиардной взвесью суточ­

н<1fl культуры путем нанесения ее при помощи пипетки

на поверхность посуды, как при заражении тест-поверх­

ностей. Вилки, ложки и ножи погружают в бактериаль­

ную суспензию на l-2 мин, оставляя незараженными их

ручки. Зараженную посуду подсушивают в комнатных

условиях. Подготовленную таким образом посуду после полного высыхания погружают в испытуемый раствор так, чтобы между :предметами находился дезинфицирую­ щий раствор, который должен полностью покрыть всю

посуду. Через определенные :интервалы (15, 30, 60 мин

и более) из дезинфицирующего раствора извлекают по одному предмету (тарелка, стакан, нож и т. д.) и ват­ ным тампоном или марлевой салфеткой тщательно про­

тирают зараженную часть каждого предмета. Отмывают

тампон или ,салфетку в 10 мл стерильной водопроводной воды с бусами в широкогорлых пробирках путем встря­ хивания в течение 10 мин. После отмыва ватный та,мпон или марлевую салфетку засевают на жидкие питатель­ ные среды. Отмывную жидкость в количестве 0,5- l мл

засевают на питательные среды для подсчета колоний.

Контролем служит аналогично загрязненная посуда, по­

груженная в ·водопроводную воду на самую длительную

экспозицию.

При гибели 100% рабочих штаммов при обеззаражи­

вании чистой посуды, искусственно инфицированной тест­

культурой, переходят ·к обеззараживанию посуды, за­ грязненной остатками пищи. Для этого перед нанесени­

ем на посуду культуры, последнюю смешивают .с не­

большим количеством овсяной, манной или какой-либо другой каши, сваренной на молоке со сливочным мас­ лом. На 10 г каши берут l мл 2-миллиардной взвеси

бактериальной или споровой культуры. Методика обез­

зараживания посуды, забор проб и высев на питатель­ ную среду аналогичны опытам с чистой посудой. Эф­

фективным считают средство, обеспечивающее гибель l 00 % микроорганизмов.

Определение активности дезинфицирующих средств при обеззараживании мочи. Изучая бактерицидную ак­

тивность дезинфицирующих средств при обработке мочи,

учитывают концентрацию действующего начала, время

обработки, температуру.

Опыты по обеззараживанию мочи проводят следую­ щим образом. Берут неско.т~ько колб или пробирок, на-

61

ливают в них по 8 мл мочи, прибавляют по 1 мл 2-мил­ лиардной взвеси тест-микробов и 1 мл инактивирован­

ной сыворотки. Растворы испытуемого дезинфицирующе­

го средства готовят в концентрациях, которые обеспечи­

вают бактерицидный эффект при испытании на тест-объ­

ектах с белковой защитой после 10-15 мин воздействия.

Растворы дезинфицирующего средства добавляют к моче в равном или двойном с ней количестве. Отмечают вре­ мя контакта и через интервалы (15, 30, 60 мин и более) пипеткой берут указанную смесь в количестве 1 мл и пе­ реносят в пробирки с 5 мл нейтрализатора, воды или

бульона. После тщательного смешивания 1 ,мл .жидкости из первой пробирки переносят во вторую с бульоном и затем высевают по 0,1 мл на твердые питательные сре­ ды ,как из первой, так и из второй пробирки. При зара­ жении мочи кишечной палочкой высев делают на среду Эндо, а -стафилокоюком - на ,мясо-лептонный или казеи­

новый агар. Чашки Петри ставят в термостат, через 1 сут

проводят ор,иен'Гировочный учет результатов, а через

7 сут - окончательный.

Контролем служат аналогично поставленные опыты

с добавлением к моче не дезинфицирующего ,раствора, а воды. Результаты опытов учитывают по отношению к контролю, который принят за 100%. Окончательное суж­

дение об эффективности действия дезинфицирующего

средства делают на основании не менее трех опытов с

совпадающими результатами. Эффек'Гивным считают средство, обеопечивающее гибел1:, 100% тест-культур.

Определение активности средств при обеззаражива­ нии кала. При разработке режимов обеззараживания ка­

ла учитывают концентрацию активно действующего ве­ щества, соотношение дезинфицирующего средства и обез­

зараживаемой массы, время обработки, температуру, консистенцию обеззараживаемых выделений, степень го­

могенизации в процессе обеззараживания.

Опыты проводят следующим образом. 20 г кала рас­

тирают в ступке и добавляют 80 мл воды. Полученную эмульсию фильтруют через двойной слой марли, разли­ вают пипеткой в пробирки по 9 мл и добавляют по 1 MJl

2-миллиардной взвеси культуры кишечной палочки. Опы­

ты начинают с концентрации, вызывающей гибель ки­

шечной палочки в моче с белком через 30 мин. Приго­

товленную эмульсию фекалий заливают равным или двойным количеством дезинфицирующего раствора и в

62

д.:1ль11ейшем нрuизводят высевы так же, как и при обез­

зараживании мочи. Результаты учитывают через 2 сут.

При положительных результатах проводят опыты с

большим количеством оформленных фекалий (200250 г). Для этого помещают их в сосуд и заливают дез­

инфицирующим раствором в равном или двойном коли­

честве по массе. Затем небольшую часть фекалий раз­

мешивают стеклянной палочкой с жидкостью, а осталь­

ное оставляют в виде небольших комочков. Через опре­ деленные промежутки времени (30, 60 мин и более) про­

изводят раздельные высевы жидкой части и комочков. Жидкую часть фекалий набирают пипеткой и засевают

так же, как мочу. Плотные части кала (комочки) заби­ рают петлей, сделанной из проволоки, и опускают в 5 мл питательной среды, где, растерев их о края пробирки, тщательно перемешивают с бульоном. Затем из этой про­

бирки 1 мл смеси переносят во вrорую пробирку, также

содержащую 5 мл бульона. Как 1из первой, так и из вто­

рой пробирки делают посев на ·среду Эндо или Левина в чашках Петри. Окончательный результат эффективно­

сти обеззараживания учитывают через 48 ч, а ориентиро­

вочный - через 24 ч.

Контролем служат аналогично поставленные опыты с добавлением вместо дезинфицирующего раствора воды. Результаты опытов учитывают по отношению к контро­ лю, который принимают за 100 %. Об эффективности ис­

следуемого вещества судят на основании не менее трех

опытов с совпадающими результатами. Эффективным

считают средство, обеспечивающее гибель 100% рабочих культур в обеззараживаемом материале.

Последующее изучение новых дезинфицирующих ве­

ществ проводят в соответствии с при,казом по Министер­

ству здравоохранения СССР: 1) изучение токсичности дезинфицирующих средств; 2) проверка в практике раз­

работанных режимов обеззараживания различных объ­

ектов (не менее чем в 10 очагах инфекционных заболе­ ваний); 3) широкая апробация в практике изучаемого

дезинфицирующего средства на базе не менее 5 дезин­ фекционных учреждений; 4) представление в ,комиссию

Министерства здравоохранения СССР по оценке, апро­

бации и внедрению новых дезинфицирующих средств

материалов для получения разрешения на производство

и применение.

Гпава 111

ДЕЗИНФЕКЦИЯ ПРИ КИШЕЧНЫХ

ИНФЕКЦИЯХ

В группу кишечных инфекций входят брюшной

тиф, паратифы, дизентерия, сальмонеллез, холера, ки­ шечная коли-инфекция, гастроэнтерит, колит, токсичес­

кая диспепсия, гепатит, полиомиелит, гельминтозы, ток­

соплазмоз. Группу таких · атропозоонозных инфекций, как лептоспирозы, бруцеллез, мелиоидоз, ящур, боль­

шинство эпидемиологов («Общая и частная эпидемио­

логия» под ред. И. И. Елкина, 1973) относят к кишеч­

ным инфекциям на основании того, что при них пора­

жает,ся в основном ,кишечник, в связи с чем и на­

ми эти разнообразные инфекции объединены в одну

группу.

При заболевании брюшным тифом, паратифами, ди­ зентерией, холерой, полиомиелитом и гепатитом источ­ ником инфекции являются больной человек в острой и стертой форме начиная с инкубационного периода и на

протяжении всей болезни, реконвалесценты, хронические

носители с периодическим обострением (нап,рим·ер, при

фекально-оральный, заражение происходит через за­ грязненные выделениями больного воду, пищевые про­

дукты, предметы обихода (посуда, белье, предметы ухо­ да за больным, игрушки и др.). Бацилловыделители (здо­ ровые носители) являют,ся одним из гла.вных источников возбудителя холеры Эль Тор.

Резервуаром сальмонеллезной инфекции являются не

только люди, но и домашние, а та·кже дикие животные

(в том числе грызуны), птицы - утк;и, гуси и чай1ш, ре­ же индю1ш и куры (Н. М. Юдицкая, 1967; Н. М. Ник;и­ тюк, 1970). Микробы во ·внешнюю среду выделяются с фекалиями и мочой больных людей и животных или ба­ циллоносителей (людей или животных, в организме ко­ торых находятся болезнетворные микробы). Одним из

факторов передачи сальмонеллезной инфекции могут

быть яйца птиц, яичный порошок, а также плохо прова­ ренное мясо (в том числе птицы), особенно колбасные

64