Материал: Власов Ю.И., Ларина Э.И. Сельскохозяйственная вирусология

переносимый цикадками. Он имеет вирионы длиной 260±20 нм и шириной 60± 5 нм. Вопрос о родствен­ ных взаимоотношениях между патогенами этой группы нуждается в дополнительном выяснении. По сообще­ нию Г. М. Развязкиной (1975), ей не удалось устано­ вить серологического родства между вирусом русской мозаики озимой пшеницы и вирусом везикулярного сто­ матита.

19. Группа вируса деформации побегов какао. Ви­ рус имеет бацилловидную форму, но отличается от рабдовирусов размерами: диаметр частиц 28 нм, длина 100... 150 нм. Переносчик — щитовки. Круг растений-хо­ зяев ограничен. Симптомы — мозаика, разрастание стеб­

В состав ее входят вирус скручивания листьев карто­ феля, вирус желтой карликовости ячменя, вирус скру­ чивания листьев фасоли и др. Вирионы изометрические, диаметром около 25 нм, переносчики — тли. Механиче­ ская передача отсутствует. Спектр хозяев сравнительно узкий.

Симптомы (на картофеле) — скручивание, хлороз и ломкость листьев.

Малоизученные группы вирусов. По-видимому, есть необходимость выделить в самостоятельную группу ви­ рус мозаики пшеницы (американской) и вирус моп-топ картофеля.

Оба вируса распространяются через почву. Пере­ носчиками этих патогенов являются грибы соответ­ ственно Polymyxa graminis и Spongospora subterranea. Вирионы палочковидной формы.

Морфологически близки между собой вирус желту- 'хи сахарной свеклы и вирус тристезы цитрусовых (ви­ рионы нитевидной формы и большой длины — до 2 мкм). Инфекция передается тлями.

Известна большая группа вирусов с изометрическими нестабильными вирионами (латентный вирус ежевики, вирус крапчатости вяза, вирус карликовости сливы, ви­ рус мчзаики яблони, вирус некротической кольцевой пятнистости черешни и др. Их более четкая классифи­ кация— дело будущего.

Как следует из сказанного, степень изученности групп вирусов растений неодинаковая. Дальнейшее выявление

групп послужит хорошей практической основой для классификации фптопатогенных вирусов.

Криптограммы. В настоящее время специалисты не придерживаются какой-либо определенной номенклату­ ры при обозначении вирусов, а присваивают им обычные простые названия — вирус табачной мозаики, вирус мо­

венные обозначения — Х-вирус, М-вирус и т. д. Подобные произвольные названия вирусов целесооб­

разно сопровождать криптограммами, в которых за­ шифрована определенная информация о патогене и его основных свойствах. Такие криптограммы разработали А. Гиббс и В. Харрисон (1968), и вирусологи постепен­ но переходят к их использованию. Каждая криптограм­ ма состоит из четырех пар символов. Например, у ви­ руса табачной мозаики криптограмма имеет следующий вид: R/1 : 2/5 : Е/Е : S/*.

Для расшифровки криптограммы необходимо знать значение каждого символа. Ниже приводятся зти све­

почечная). Следовательно, из записи криптограммы видно, что ВТМ содержит в своем составе одноцепочеч­

ную РНК.

В т о р а я п а р а символов (2/5) означает молеку­ лярную массу нуклеиновой кислоты (в миллионах угле­ родных единиц) и ее процентное содержание в инфек­ ционных частицах.

Из записи второй пары символов криптограммы ВТМ следует, что молекулярная масса РНК ВТМ составляет 2 млн., а содержание нуклеиновой кислоты в вирионс

равно 5%. Если речь идет о фрагментированном геноме вирусов, то это также отражается в криптограмме. Ког­ да разные фрагменты генома входят в состав однород­ ных частиц, символ указывает общую молекулярную массу всех фрагментов. В случае нахождения фрагмен­ тов генома в частицах разного типа описывается от­ дельно состав частиц каждого тппа.

Т р е т ь я п а р а символов (Е/Е) характеризует фор­ му вириона и форму нуклеокапсида, т. е. нуклеиновой кислоты и прочно связанного с ней белка. Для обозпа-

чения этих структур приняты следующие символы: S — сферическая форма, Е — удлиненная структура с параллельными сторонами и незакругленными конца­ ми, U — удлиненная с параллельными сторонами и за­ кругленным концом (концами), X — сложная структура или отличная от перечисленных.

Применительно к ВТМ третья пара символов озна­ чает (Е/Е), что вирион п нуклеокапсид ВТМ имеют уд­ линенную структуру с параллельными сторонами и не-

заражаемого хозяина и тип переносчика. Символы для

комары, Fu — грибы, Gy — клопы, Ne — нематоды, Ps —

но, для всех пар символов используется знак *. Сведе­ ния, заключенные в круглые скобки ( ), указывают на то, что они сомнительны, сведения в квадратных скоб­ ках [ ] относятся к вирусной группе в целом.

Таким образом, применительно к ВТМ четвертая пара символов (S/*) расшифровывается так: заражае­ мые хозяева — семенные растения, переносчик — неиз­ вестен.

В разделах, посвященных отдельным вирусным бо­ лезням растений, мы будем сопровождать обычные на­ звания вирусов их криптограммами.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ФИТОПАТОГЕННЫХ ВИРУСОВ

Диагностика вирусных болезней растений — это раз­ личные этапы и приемы определения вида вируса, явля­ ющегося причиной изучаемого заболевания. Основыва­ ется диагностика на данных об основных свойствах ви­ руса и, в определенной мере, на материалах наблюде­ ний за развитием’ заболевания. Для диагностики вирус­ ных болезней растений предлагается использовать 10 ступеней (этапов). К ним относятся: 1) определение

вида зараженного растения, 2) изучение симптомов за­

болевания, 3) оценка распространенности заболевания, условий развития и характера, его распределения, 4) изучение инфекционности посредством инокуляции сока, передача переносчиками, прививкой или повили­ кой, 5) инокуляция или прививка серии растений-ин­ дикаторов (и реинокуляция на тест-растения) с целью определения круга растений-хозяев вируса и выделения вируса (или вирусов), 6) определение сохранения ин­

фекционности в соке после хранения, разведения, про­ гревания при различных температурах в течение 10 мин, 7) исследования под электронным микроскопом, 8) серо­

логический тест, 9) изоляция, очистка, определение фп- зико-химических свойств и приготовление специфиче­ ской антнсыворотки, 10) инокуляция здоровых растений

того же вида.

Круг необходимых диагностических исследований в зависимости от изучаемого вируса может быть значи­ тельно сужен. Например, при диагностике Х-вируса кар­ тофеля следует использовать серологический анализ и в дополнение (особенно, если исследуются сорняки) про­ тестировать на растении-индикаторе Gomphrena globosa L. При диагностике же вируса русской мозаики ози­ мой пшеницы достаточно провести электронную микро­ скопию.

Идентификация вируса — итог всестороннего изуче­ ния свойств исследуемого вируса и определение его при­ надлежности к одной из существующих в системе клас­ сификации групп вирусов, установление его полного сходства с ранее описанными вирусами и их штаммами или, наоборот, выявление нового вида или штамма вируса.

Морфологические и биологические особенности виру­ сов— ультрамикроскопические размеры, отсутствие раз­ множения на искусственных питательных средах, способ­ ность заражать растения различных ботанических семейств, антигенная активность и др.— во многом оп­ ределяют отличие диагностических приемов от приемов, используемых при работе с грибными и бактериальны­ ми заболеваниями.

К основным методам диагностики фитопатогенных вирусов относятся следующие: 1) визуальный; 2) уста­ новление инфекционности заболевания (передача соком, механическим способом, переносчиками — насекомыми,

клещами, грибами, нематодами; прививками, повили­ кой); 3) метод растений-индикаторов; 4) серологиче­ ский метод; 5) электронная микроскопия; 6) метод включений; 7) анатомо-цитологический метод; 8) люми­

несцентный анализ; 9) химический метод.

Методы диагностики можно подразделить на пря­ мые (электронная микроскопия, метод включений) и кос­ венные (растений-индикаторов, серологический, люми­ несцентный анализ и др.). Наиболее результативными методами в вирусологии являются электронно-микро- скопический, растений-индикаторов, серологический, включений, установление инфекционности посредством переносчиков (для вирусов, механически не передаю­ щихся). Нередко для диагностики используют комплекс методов.

Визуальный метод диагностики. Диагностика вирус­ ных болезней по внешним симптомам — прием вспомо­ гательный, позволяющий обычно сделать лишь предва­ рительную ориентировку в отношении природы болез­ ни. По разнообразию симптомы вирусных болезней можно сгруппировать в 4 типа: 1) задержка роста, 2) изменение окраски различных органов, 3) изменение

формы и размеров листьев, плодов, цветков, 4) пораже­ ния некротического типа.

Задерж ка роста. В результате задержки роста меж­ доузлий растения могут приобретать «карликовый» вид (например, образование розеток листьев вместо нор­ мально развитых растений с колосьями, наблюдаемое при поражении зерновых злаков вирусами желтой кар­ ликовости ячменя и русской мозаики озимой пшеницы, резкая задержка роста при заболеваниях картофеля, курчавая карликовость, скручивание листьев и др.). Отмечены также заболевания, при которых происходит задержка роста отдельных органов. Примером могут служить измельчение плодов при болезнях мелкоплодиость вишни, гигантизм томатов.

Изменение окраски. Наиболее характерным симпто­ мом многих вирозов являются мозаичная расцветка, различные пятнистости и узоры (кольца, полукольца, извилистые рисунки, дубовидные, линейные узоры и др.), главным образом на листьях, а также на плодах и цвет­ ках. В зависимости от расположения мозаичной (пест­ рой) расцветки на листьях ее дифференцируют на прижилковую мозаику (прижплковая мозаика клевера,