Материал: Practicum_po_microbiologii

1.4. Правила взятия, консервирования и транспортировки патологического материала

При отборе и обработке патологического материала для пересылки в лабораторию необходимо придерживаться следующих правил:

- учитывать патогенез болезни и тропизм возбудителя;

- использовать стерильные инструменты и посуду;

- доставлять его в максимально сжатые сроки;

- отбирать материал до начала лечения антимикробными препаратами.

В лабораторию могут быть направлены: а) пробы материала от больных и подозрительных в заболевании животных: кровь, сыворотка крови, кал, моча, молоко, экссудаты, гной, соскобы с кожи и др.; б) патологический материал от трупов животных: абортированный плод, трубчатая кость, лимфоузлы, мышцы, головной мозг, спинной мозг, паренхиматозные органы и др.; в) пробы из объектов внешней среды: воды, почвы, фуража; клещи, насекомые, грызуны и др.

Трупы мелких животных, а также поросят, ягнят, телят лучше посылать целиком во влагонепроницаемой таре.

Трубчатые кости, посылаемые на исследование, должны быть целыми, с неповрежденными концами, обернутыми в марлю или полотно, смоченное дезинфицирующей жидкостью (5%-ным раствором карболовой кислоты).

Перед отбором молока сосок вымени дезинфицируют 70°-ным спиртом, сдаивают 100 – 150 мл молока в банку с дезраствором, а последующие порции в количестве 30 мл – в стерильные сосуды.

Кровь берут в пробирки или колбы из яремной вены с соблюдением стерильности. Кал берут из прямой кишки стеклянной трубочкой с оплавленными краями, один конец трубочки закрывают ватно-марлевой пробкой. После взятия кала трубку опускают в пробирку с физиологическим раствором.

Мочу у животных берут с помощью катетера.

Экссудат берут пастеровскими пипетками или стерильными тампонами.

Соскобы со слизистых оболочек и кожи берут стерильным скальпелем в стерильную посуду с пробкой. Абортированный плод первой половины беременности направляют целиком. От плодов второй половины беременности берут паренхиматозные органы или плод направляют целиком.

От трупов обязательно берут сердце целиком с кровью.

Кусочки селезенки, почек, печени с желчным пузырем берут, используя стерильные инструменты и стерильную посуду.

Желудок и кишечник перевязывают лигатурой с обоих концов и помещают в отдельную посуду.

Мозг для исследования направляют целиком.

При упаковке патологического материала необходимо исключить загрязнение его посторонней микрофлорой из внешней среды.

Патологический материал должен быть доставлен в лабораторию в течение первых 24 часов после его взятия. Если эти условия трудно выполнить, то материал необходимо консервировать 30%-ным водным раствором глицерина или 10%-ным водным раствором хлористого натрия или раствором глицерина с хлористым натрием (глицерина – 250,0 мл; хлористого натрия – 5,0 г; дистиллированной воды – 750,0 мл).

Доставка патологического материала в лабораторию осуществляется нарочным. На взятый патологический материал, направляемый в лабораторию, составляется сопроводительное письмо по следующей форме:

Сопроводительное письмо на патологический материал

В ___________________________________ветеринарную лабораторию

^{(республиканскую, областную, районную)}

Адрес _______________________________________________

При этом для бактериологического, гистологического, токсикологического, микотоксикологического, серологического исследованиям направляется материал (перечислить с нумерацией весь материал, например: 1 – сердце с кровью, 2 – кусочек печени с желчным пузырем, 3 – трубчатая кость и т.д.) от________________________________________________________________

__________________________________________________________________ ^{(указать вид животного, пол, возраст, инвентарный номер, группу, владельца).}

Дата заболевания (животного) ____________, падежа________________

Клиническая картина__________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________

Данные патологоанатомического вскрытия________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________

Эпизоотологические данные____________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________

Предположительный диагноз____________________________________

Прошу_________исследовать_________на_________________________

Просим исключить заболевание__________________________________

Дата___________________ Должность_________________________________

Подпись________________________________________(Фамилия полностью)

Обратный адрес____________________________________________________

Задания для самостоятельной работы

1. Ознакомиться с кафедральной лабораторией, оборудованием и аппаратурой.

2. Подготовить посуду, инструменты и материалы для отбора проб патологического материала, включая консерванты.

3. Провести отбор и упаковку патологического материала.

4. Под руководством преподавателя составить сопроводительное письмо на патологический материал.

Вопросы для самоподготовки и контроля знаний

1. Назначение, структура ветеринарных лабораторий и ее оборудование, аппаратура.

2. Какие правила по технике безопасности необходимо соблюдать при работе в лаборатории?

3. Назовите методы исследований, применяемые при лабораторной микробиологической диагностике инфекционных болезней животных.

4. В чем заключаются правила взятия, консервирования и транспортировки патологического материала для исследования?

А. МИКРОСКОПИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

ИССЛЕДОВАНИЙ

ТЕМА 2. Устройство микроскопа и правила работы с ним (2.1). Виды микроскопии (2.2)

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить устройство микроскопа и освоить правила работы с ним. Дать представление о видах и назначении различных методов микроскопии.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Микроскопы и набор готовых окрашенных препаратов-мазков. Иммерсионное масло, осветители, таблицы, схемы, диаграммы.

Микроорганизмы представляют собой мельчайшие живые организмы, невидимые невооруженным глазом. Размеры их колеблются в широких пределах – от 0,2 до 10 микрометров (мкм) и более (1 мкм составляет 1/1000 долю миллиметра).

Форму и другие особенности бактериальных клеток изучают при помощи микроскопии чаще всего в убитом окрашенном состоянии, реже – в живом в неокрашенном виде.

2.1. Устройство оптического микроскопа.

Микроскопы позволяют исследовать объекты в проходящем свете. Такие микроскопы состоят из механической и оптической частей (рис.1).

Механическая часть включает штатив (1) с предметным столиком (2) и тубус (16). Предметный столик с помощью винтов может перемещаться в горизонтальной плоскости (3). Он имеет две клеммы, фиксирующие препарат(4). Верхняя часть штатива – тубусодержатель – может перемещаться с помощью макрометрического винта (12) и микрометрического винта (13), предназначенных соответственно для грубой и точной фокусировки препарата. Микрометрический винт является одной из наиболее хрупких частей микроскопа и обращаться с ним нужно особенно осторожно. Полный поворот его передвигает тубус на 0,1 мм.

В верхней части тубусодержателя находится вращающийся вокруг своей оси револьвер (14), в отверстия которого ввинчены объективы (15). В верхний конец тубуса вставляется окуляр (18).

Рис.1 Микроскоп МБР-1: 1 – основание микроскопа; 2 – предметный столик; 3 – винты для перемещения предметного столика; 4 – клеммы, фиксирующие препарат; 5 – конденсор; 6 – кронштейн конденсора; 7 – винт, укрепляющий конденсор в гильзе; 8 – рукоятка перемещения конденсора; 9 – рукоятка ирисовой диафрагмы конденсора; 10 – зеркало; 11 – тубусодержатель; 12 – макрометрический винт; 13 – микрометрический винт; 14 – револьверное устройство для объективов; 15 – объективы; 16 – наклонный тубус; 17 – винт для крепления тубуса; 18 – окуляр.

Оптическая часть состоит из объективов, окуляров и осветительного аппарата.

Окуляр вставляется в верхний конец тубуса. Он состоит из двух линз в оправе. На окуляре имеются цифровые обозначения, показывающие степень увеличения изображения в 7, 10, 15 раз.

Рис. 2. Ход лучей в иммерсионном объективе

Объектив представляет собой систему оптических линз. На объективах имеются обозначения, указывающие увеличение, даваемое объективом (х8, х40, х90). Различают сухие и иммерсионные объективы. Объективы, дающие увеличение в 8 и 40 раз, называются сухими, так как при работе между объективом и препаратом находится слой воздуха. Иммерсионным называется объектив, при работе с которым между препаратом и объективом помещается капля иммерсионного (кедрового) масла (рис.2). Иммерсионное масло имеет оптический коэффициент преломления, близкий к коэффициенту преломления стекла, благодаря этому световые лучи, не отклоняясь от своего первоначального направления, попадают на линзу объектива. В рассматриваемом микроскопе объектив с увеличением х90 является иммерсионным. Общее увеличение, которое дает микроскоп, определяется произведением величины увеличения объектива на величину увеличения окуляра. Отчетливость получаемого изображения зависит от разрешающей способности микроскопа – минимального расстояния между двумя точками, воспринимаемыми раздельно. Световой микроскоп при освещении видимым светом имеет разрешающую способность около 0,2 мкм.