Материал: Practicum_po_microbiologii

Внимание! Если размещение файла нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам

Эту краску чаще всего используют при окраске по Граму в модификации по Синеву, пропитывая этой краской и высушивая полоски фильтровальной бумаги.

5. Раствор Люголя

Йодид калия

2 г

Дистиллированная вода

10 мл

Кристаллический йод

1 г

Смесь хорошо закупоривают и ставят на сутки в термостат, после чего добавляют 300 мл дистиллированной воды.

3.3. Простой метод окрашивания препарата для микроскопии

Окраску препаратов производят на специально оборудованном столе, покрытом линолеумом, пластиком, стеклом. На столе должен быть сосуд с дистиллированной водой, емкость для слива красителей, подставка из двух стеклянных трубочек, соединенных с обеих сторон резиновыми трубками (рис. 8), флаконы для красок с пипетками и резиновыми баллончиками (рис. 9).

Рис. 8. Чашка с подставкой для окраски препаратов

Рис. 9. Флаконы для красок

При простом методе окраски пользуются одним красителем: разведенным фуксином (1-2 мин); щелочной метиленовой синью Леффлера (3-5 мин). Фиксированный препарат помещают мазком вверх на подставку. На мазок пипеткой наносят краситель так, чтобы он весь был покрыт раствором. По истечении необходимого времени краситель сливают, препарат промывают водой и высушивают между листами фильтровальной бумаги или на воздухе (мазки из крови и др.). На сухой мазок наносят каплю иммерсионного масла и микроскопируют препарат иммерсионным объективом микроскопа. Простой метод окрашивания препаратов позволяет установить наличие или отсутствие бактерий в исследуемом материале, изучить их морфологию (форму, расположение).

3.4. Основные формы бактерий

При изучении окрашенных препаратов бактерий под иммерсионной системой оптического микроскопа хорошо различимы три основные их формы: шаровидная (кокки), палочковидная или цилиндрическая (бактерии и бациллы) и извитая (вибрионы, спириллы, спирохеты) (рис. 10).

Рис. 10. Основные формы бактерий:

1 - стафилококки; 2, 3 - диплококки; 4 - стрептококки; 5 - тетракокки; 6 - сарцины, 7, 8, 9 - различные виды палочкообразных; 10 - вибрионы; 11 - спириллы; 12 - спирохеты

Кокки. По форме кокки могут быть сферическими, эллипсовидными, бобовидными и ланцетовидными. В зависимости от взаимного расположения они подразделяются на:

1. Микрококки (micrococcus), расположение клеток беспорядочное и закономерности в их делении не наблюдается.

2. Стафилококки (греч.staphylococcus - виноградная гроздь), скопление особей образуется за счет деления их в нескольких плоскостях, напоминает виноградные гроздья.

3. Диплококки (греч. diplococcus - двойной) - клетки, соединенные попарно. Делятся они в одной плоскости. Диплококки могут иметь круглую, ланцетовидную форму или форму боба, вогнутые стороны которого обращены друг к другу.

4. Стрептококки (греч. streptococcus - цепочка) - цепочки различной длины, образованные из клеток, которые делятся только в одной плоскости.

5. Тетракокки (греч, tetracoccus - четыре) - кокки, которые располагаются по четыре и делятся в двух взаимно перпендикулярных плоскостях.

6. Сарцины (sarcio) - кокки, образующие правильные пакеты по 8-16 клеток.

Палочковидные бактерии. Это самая многочисленная группа бактерий, которая подразделяется на две группы: палочки, не образующие споры - бактерии (bacterium) и образующие споры - бациллы (bacillus).

Палочки, у которых диаметр споры превышает ширину вегетативной клетки, принято называть клостридиями (clostridium).

Извитые бактерии. Вибрионы - клетки образуют 1/2-1/4 завитка спирали и напоминают запятую (vibrio); спириллы (spirillum) - бактерии, имеющие форму спирально извитых палочек с 4-6 извитками; спирохеты (spirochetum) - бактерии, тело которых представлено множеством завитков вдоль осевой нити.

Задания для самостоятельной работы

1. Ознакомиться с набором красок, оборудованием для окраски препаратов

2. Приготовить препараты из взвеси бактериальных культур: кишечной палочки, стафилококка, вакцинного штамма бацилл сибирской язвы, фиксировать и окрасить простым методом.

3. Провести микроскопию этих препаратов, микрокартину зарисовать, результаты исследований внести в бланк экспертизы.

Методические указания к оформлению бланка экспертизы

Бланк экспертизы является одним из главных документов при проведении исследований в ветеринарных лабораториях.

В существующую форму бланка внесены небольшие изменения и дополнения, адаптированные к учебной программе.

Студенты вносят в свои тетради форму бланка экспертизы в трех экземплярах.

По мере прохождения практического курса общей микробиологии студенты под руководством преподавателя заполняют бланки экспертизы при проведении исследований на стафилококкозы, колибактериоз и сибирскую язву.

Экспертиза №______

Дата поступления материала______________________________________

Адрес и название хозяйства_______________________________________

Что прислано на исследование____________________________________

В каком состоянии принят материал_______________________________

______________________________________________________________

На что исследовать______________________________________________

Ход исследования

Патологоанатомические и органолептические данные________________

______________________________________________________________

Бактериологическая диагностика

1 этап. Микроскопическое исследование исходного материала

а) методы окраски_______________________________________________

б) морфология микроба__________________________________________

______________________________________________________________

в) отношение к краске по Граму___________________________________

г) спорообразование_____________________________________________

д) капсулообразование___________________________________________

е) подвижность_________________________________________________

ж) другие особенности __________________________________________

Микрокартина:

В патматериале В чистой культуре

2 этап. Посевы на питательные среды, для выделения чистой культуры и изучение культурально-биохимических свойств

Наименование материала, из которого

произведен посев

Наименование сред

Дата

исследования

а) особенности выделения чистой культуры (отношение к кислороду, температуре и срок выращивания)

б) культуральные свойства на жидких средах_______________________

______________________________________________________________

в) культуральные свойства на плотных питательных средах ___________

______________________________________________________________

Микроскопия культур (морфологические и тинкториальные свойства)

______________________________________________________________

______________________________________________________________

Дата пересева__________________________________________________

г) биохимические свойства выделенного микроба

Дата

исследований

Микробная

культура

Сахаролитические

Протеолитические

Гемолитические

Другие тесты

Результаты по определению чувствительности выделенных бактерий к антимикробным препаратам__________________________________________

__________________________________________________________________

3 этап. Биологические исследования

Вид и

количество

животных

Дата и время заражения

Каким

материалом и место его

введения

Дата и время падежа или убоя

Результаты вскрытия и бак. исслед.

Результаты исследования:________________________________________

______________________________________________________________

______________________________________________________________

Заключение____________________________________________________

Рекомендации__________________________________________________

______________________________________________________________

______________________________________________________________

Источник: https://files.student-it.ru/previewfile/279395